Введение. Проблема перинатальных потерь и нарушений дальнейшего развития потомства является одной из наиболее актуальных в современной медицине и ветеринарии [1–2]. Из всех патологических воздействий, которым может быть подвержен зародыш в период внутриутробного развития, гормоны являются наиболее распространенными и клинически значимыми, приводящими к различным отклонениям в развитии органов. В эмбриогенезе человека и животных наиболее уязвимым является период раннего органогенеза (9–11-е дни у крыс и мышей, 7–21-е дни у человека) [3].
Влияние избыточного гормонального фона и экзогенных соединений стероидной химической природы, применяемых для сохранения беременности, могут оказать неявный, патологический отсроченный эффект на уязвимые клетки и ткани потомства, находящиеся в состоянии пролиферации и активного роста [4–5].
Препараты эстрогенового ряда на разных стадиях пренатального периода могут нарушать нормальное течение беременности и родов, привести к развитию патологии плода [6–7].
Ряд авторов приводят экспериментальные исследования о влиянии препаратов эстрогенового ряда на нормальное развитие плода. Фенотипическими показателями пренатального воздействия эстрогенов являются соматометрические показатели: масса тела, длина тела, аногенитальное расстоя-ние (АГР) [8–9].
Цель исследования – изучить влияние препарата эстрогенового ряда фулвестранта в дозе 200 мкг/кг на соматометрические показатели потомства женского пола.
Задачи: изучить влияние препарата эстрогенового ряда фулвестранта в дозе 200 мкг/кг на соматометрические показатели потомства женского пола и провести статистическую обработку полученных данных в отношении соматометрических показателей у исследованных животных.
Материалы и методы. Опыты проводились на потомстве лабораторных мышей, матерям которых на 11-й день беременности была выполнена внутримышечная однократная инъекция различных доз препарата эстрогенового ряда – фулвестранта. Расчет доз и их эффективности производили в соответствии с рекомендуемыми в литературе коэффициентами [10–12]. В исследовании анализировались две группы: первая (n=15) – интактная без воздействия, во второй опытной группе вводили однократно, внутримышечно фулвестрант 0,8 мл 0,0005 % в дозе 200 мкг/кг (Ф–200 мкг/кг). На выполнение исследований получено разрешение локального экспертного совета по биомедицинской этике Башкирского государственного медицинского университета (протокол № 3 от 17.03.2014).
Потомство женского пола в возрасте одного месяца отделяли и подращивали группами до момента половой зрелости [13–15]. Животных помещали в отдельные клетки с соответственной маркировкой вводимого препарата. У полученного потомства проводились соматометрические исследования массы тела, длины тела, длины «нос – ухо», длины «ухо – ухо», длины хвоста, длины ступни задней правой лапки и аногенитального расстояния. Измерение массы тела производилось с помощью электронных весов марки BW-500 с точностью измерения 0,1 г; автоматическая калибровка; единицы измерений – граммы, унции, караты; габариты – 120×80×25 мм (Южная Корея); параметры тела и АГР измеряли при помощи электронного штангенциркуля Digital Caliper со встроенным жидко-кристаллическим дисплеем; диапазон – 0–150 мм; точность – 0,01 мм (Южная Корея).
Экспериментальная часть исследования выполнена в соответствии с Директивой 2010/63/EU Европейского парламента и Совета европейского союза по охране животных, используемых в научных целях.
Для каждого параметра вычисляли среднее арифметическое значение и его стандартную ошибку (М±SD). Достоверность различий средних оценивали с помощью t-критерия Стьюдента на уровне значимости Р≤0,05.
Результаты и их обсуждение. Данные соматометрических показателей потомства женского пола белых беспородных лабораторных мышей на фоне пренатального однократного внутримышечного введения синтетического препарата фулвестрант представлены в таблице.
Соматометрические показатели потомства женского пола белых беспородных
лабораторных мышей при воздействии фулвестранта
|
Показатель (среднего значения) |
1-я группа |
2-группа |
|
интактная |
Ф-200 мкг/кг |
|
|
Масса, г |
20,50±2,14 |
24,28±1,17* |
|
Длина тела, мм |
88,00±1,41 |
94,12±4,13 |
|
Длина «нос – ухо», мм |
22,20±0,45 |
19,00±1,58* |
|
Длина «ухо – ухо», мм |
12,00±0,01 |
18,28±0,57* |
|
Длина хвоста, мм |
91,60±2,88 |
92,20±6,67 |
|
Длина ступни задней правой лапки, мм |
17,22±0,41 |
22,90±1,67* |
|
Аногенитальное расстояние, мм |
0,67±0,12 |
0,46±0,09* |
*Различия с интактной группой при Р≤0,05.
Сравнительный анализ соматометрических показателей потомства женского пола белых беспородных лабораторных мышей при однократном воздействии препарата фулвестрант показал, что в анализируемой группе Ф–200 мкг/кг) масса увеличивается на 18,4 %, показатель «длина тела» незначительно увеличивается – на 6,9 % по сравнению с интактной группой. Длина «нос – ухо» (мм) уменьшается на 14,4 % (Р ≤0,05); длина «ухо – ухо» (мм) увеличивается на 52,3 % (Р ≤0,05); Показатель «длина хвоста» не показал достоверно значимые различия. Длина ступни правой задней лапки (мм) увеличивается на 32,9 % (Р ≤0,05) по сравнению с интактной группой. Величина аногенитального расстояния (мм) потомства женского пола лабораторных мышей при однократном воздействии препарата фулвестрант в исследуемой группе (Ф–200 мкг/кг) уменьшается по сравнению с интактной группой на 31,3 % (Р ≤0,05).
Заключение. Таким образом, воздействие препарата эстрогенного ряда в пренатальный период вызывает изменения соматометрических показателей потомства у лабораторных мышей, изменения этих промеров были зависимы от вводимых экспериментальных доз. Разработка биологической модели пренатального введения эстрогенов может помочь в своевременной диагностике и разработке комплекса профилактических мероприятий в период закладки органов. Полученные результаты свидетельствуют об актуальности проблемы лимитирования дозозависимого действия препаратов эстрогенного ряда в период пренатального развития органов.
