Код ВАК 4.2.2 Санитария, гигиена, экология, ветеринарно-санитарная экспертиза и биобезопасность

Научнаястатья/Research Article

УДК619:616-07:636.92

DOI:

Александр Алексеевич Жигарев

Красноярский государственный аграрный университет, Красноярск, Россия

Zhigarev98@mail.ru

ИЗМЕНЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ КРОЛИКОВ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ «ГУМАТ КАЛИЯ 80» В КАЧЕСТВЕ РАДИОПРОТЕКТОРА

Статья посвящена определению радиопротекторных свойств препарата «Гумат калия 80» при тритиевом воздействии в субклинических дозах на организм кроликов. В работе приведены данные по загрязнению биосферы тритием, определена его миграционная активность в компонентах окружающей среды. Изложены механизмы всасывания и миграции трития в организме животных, его влияние на здоровье и продуктивность. В работе приведена классификация радиопротекторов, изложены характеристики, механизмы действия, рекомендуемые дозы радиопротекторных препаратов.В статье определена степень изменения фагоцитарной активности, гематологических и биохимических показателей венозной крови кроликов при воздействии тритиевой воды (62,29мГр) и при применении радиопротектора «Гумат калия 80». Работа проведена на кафедре института ИПБиВМ, научно-исследовательском испытательном центре ФГБОУ ВО Красноярский ГАУ. В работе оценены радиопротекторные свойства препарата «Гумат калия 80» при тритиевом воздействии в субклинических дозах на организм кроликов. В результате исследования установлено, что при дозовой нагрузке в (62,29мГр) тритиевого воздействия в русле крови кроликов регистрируется эритроцитоз, лейкоцитоз и увеличение уровня гемоглобина, что обязано стимулирующему воздействию трития. Однако при субклинических дозах трития в сыворотке крови снижается количество альфа-глобулинов, АСТ, щелочной фосфатазы и увеличивается содержание бета-глобулинов и АЛТ, что свидетельствует о токсическом воздействии трития на печень и почки. Применение радиопротектора «Гумат калия 80» на 20-й день восстанавливает количество форменных элементов крови, биохимические показатели крови кроликов до контрольных и референсных значений. Применение «Гумат калия 80» увеличивает фагоцитарную активность клеток крови до контрольных значений.  При тритиевом воздействии в качестве радиопротектора рекомендуется использование «Гумат калия 80» в дозе 10^-4 г/л.

Ключевые слова:тритий, малые дозы, гематологические параметры, венозная кровь, кролики, поглощенная доза, гумат калия, радиопротектор.

Для цитирования: Жигарев А.А. Изменение показателей крови кроликов при применении «Гумат калия 80» в качестве радиопротектора // Вестник КрасГАУ. 2025 № .С. DOI:

AlesanderА. Zhigarev

Krasnoyarsk state agrarian university, Krasnoyarsk, Russia

Zhigarev98@mail.ru

CHANGES IN BLOOD INDICATORS OF RABBITS WHEN USING "POTASSIUM HUMATE 80" AS A RADIOPROTECTOR

The article is devoted to the determination of radioprotective properties of the drug "Potassium Humate 80" under tritium exposure in subclinical doses on the organism of rabbits. The work presents data on the contamination of the biosphere with tritium, its migration activity in the components of the environment is determined. The mechanisms of absorption and migration of tritium in the organism of animals, its influence on health and productivity are described. The work presents the classification of radioprotectors, the characteristics, mechanisms of action, recommended doses of radioprotective drugs. The article determines the degree of change in phagocytic activity, hematological and biochemical indices of venous blood of rabbits under the influence of tritium water (62.29mGy) and with the use of the radioprotector "Potassium Humate 80". The work was carried out at the department of the Institute of IPBiVM, the research and testing center of the Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education Krasnoyarsk State Agrarian University. The work evaluates radioprotective properties of the drug "Potassium Humate 80" under tritium exposure in subclinical doses on the organism of rabbits. The study established that under a dose load of 62.29mGy of tritium exposure, erythrocytosis, leukocytosis and an increase in the hemoglobin level are recorded in the bloodstream of rabbits, which is due to the stimulating effect of tritium. However, under subclinical doses of tritium in the blood serum, the amount, of alpha globulins, AST, alkaline phosphatase decreases and the content of beta globulins and ALT increases, which indicates a toxic effect of tritium on the liver and kidneys. The use of the radioprotector "Potassium Humate 80" on the 20th day restores the number of formed elements of the blood, biochemical parameters of the blood of rabbits to the control and reference values. The use of "Potassium Humate 80" increases the phagocytic activity of blood cells to the control values. In case of tritium exposure, it is recommended to use “Potassium Humate 80” as a radioprotector in a dose of 10-4 g/l.

Keywords:tritium, low doses, hematological parameters, venous blood, rabbits, absorbed dose, potassium humate, radioprotector.

For citation: Zhigarev A.A. Changes in blood parameters of rabbits when using "Potassium Humate 80" as a radioprotector // Bulletin of KrasSAU. 2025 No. . P. . DOI:

Введение. Факторы окружающей среды оказываютзначительное влияние на биологические объекты, одним из таких факторов является радиация. Регулярная деятельность атомных электростанций (АЭС), добыча уранорадиевых руд, радиационные техногенные аварии и испытания ядерного оружия (в XX веке) сформировали глобальный техногенный фон. Добыча руды, переработка, обогащение урана, производство тепловыделяющих сборок (ТВЭЛ), наработка оружейного плутония в ядерных реакторах, способствовали увеличению концентрации техногенных радионуклидов в компонентах биосферы. При работе АЭС образуются газо-аэрозольные штатные выбросы и жидкие радиоактивные отходы [1]. В начале эксплуатации реакции ядерного деления (середина ХХ века) учеными недооценена радиационная опасность слаборадиоактивных отходов, в результате некоторые территории получили дополнительное техногенное радиоактивное загрязнение[2]. В настоящее время происходит изменениетехногенного радиационного фона, расширяются территории с повышенным уровнем радиации, основные радиобиологические воздействия определяются низкоинтенсивным излучением изотопов:трития (³H), цезия (¹³⁷Cs),стронция (⁹⁰Sr) и углерода (¹⁴C).

Тритий (³H) – радиоактивный изотоп водорода с периодом полураспада (Т_1/2) 12,3 года, бета-излучатель с энергией бета-частиц – 18,59 КэВ [3, 4], в биосфере присутствует в виде естественного и антропогенного изотопов. Природный ³H образуется в результате взаимодействия протонов и нейтронов вторичного космического излучения с атомами атмосферы: N, O₂, Ar [5]. Согласно нормам агентства по охране окружающей среды (США), предельно допустимая концентрация (ПДК) ³H составляет 740 Бк/л, в Евросоюзе – 100 Бк/л, в России – 7700 Бк/л [5].В промышленных газо-аэрозольных выбросах предприятий ядерного топливного цикла ³H содержится в основном в 3-х соединениях: тритиевая вода (НТО), тритированный водород (HT) и тритированный метан (CH₃T) [7, 8, 9]. Эффективный период нахождения НТ и CH₃T в атмосфере оценивается в 5-10 лет [10]. Основными процессами утилизации ³H из атмосферы являются бактериальное воздействие и фотохимическое окисление НТ и CH₃T, при этом конечным продуктом распада является НТО, которая обладает высокой биологической активностью в отличие от НТ и CH₃T [5, 11, 12].

В настоящее время фоновая концентрация ³H в воде составляет 0,12 Бк/л, 90 % природного ³H находится в виде НТО в гидросфере, 6,8 % – в стратосфере и 0,4 % – в тропосфере[5]. И.Ю. Катрич оценивает удельную активность трития в естественных водоисточниках России, к 2100 году равновесное содержание трития в атмосфере и биосфере составит около 2,5×10²²Бк [13].

В Российской Федерации одним из основных источников промышленного ³H является ФГУП ПО «Маяк», в зоне наблюдения этого предприятия концентрация трития в 5-25 раз превышает фоновые значения. К источникам ³H в ФГУП ПО «Маяк» относят: промышленные реакторы, заводы по переработке отработанного ядерного топлива, промышленные резервуары хранения жидких радиоактивных отходов: озеро Кизилташ, искусственные водоемы в долине реки Теча, озеро Карачай [8, 14, 15, 16, 17]. Установлено, что концентрация ³H в объектах биосферы, находится в обратной зависимости от расстояния от ФГУП ПО «Маяк», при этом имеет значение географическое расположение и господствующее направление ветра. Значительное содержание ³H установлено в озерах:Татыш (107 Бк/л), Улагач (113 Бк/л), находящихся в 6-7 км к югу от ФГУП ПО "Маяк", с удалением снижается удельная активность ³H в водных объектах, на удалении 50 км и более содержание ³H составляло 10 Бк/л[8, 18, 19].

Содержание ³H в жидких сбросах значительно превышает сумму других изотопов, в газообразных выбросах тритий уступает суммарной радиоактивности благородных газов, которые, в отличие от ³H, обладают низкой биологической активностью [5].

Определено, что миграция ³H в биосфере происходит в виде НТО [8]. Вблизи радиационно-опасных объектов ³H хорошо накапливается в окружающей среде [5]. В воздухе ³H обладает высокой подвижностью, благодаря этому он проникает в помещения, повышая радиационный фон и увеличивает радиационное загрязнение открытых водоемов, в результате выбросы ³H в атмосферу следует рассматривать как негативный фактор, влияющий на здоровье и продуктивность животных [6]. При контакте поверхности воды с атмосферой, содержащей пары ³H, изотоп попадает в воду и растворяется в ней. Тритий попадает в водоемы с осадками, в результате вымывания из воздуха [14], он включается в цепь миграции: вода, почва – растение – животные – агропродукция[7].

В животных и растительных организмах НТО замещает Н₂0 и достигает концентрации близкой к окружающей среде [15].Радиобиологические эффекты тритиевого воздействия в форме оксида на организм животных в 2-6 раз выше, чем действие гамма-излучения цезия (¹³⁷Cs)[21, 22].Пьетржак-Флис, З с соавторами оценили распределение трития по органам и тканям у кроликов при введении трития с водой и кормом. В опыте в течении 29 дня кроликам скармливалась тритированнаялюцерна, НТО и тритированнаялюцерна, НТО, при этом радиационная нагрузка составляла 185 Бк/г массы тела. В работе установлено, что форма введения в организм трития определяет его удельную активность в органах и тканях, при скармливании органически связанного трития (тритированнаялюцерна) содержание трития в тканях выше, чем при введении трития в виде HTO. Кроме этого, учеными определен тропизм трития к тканям организма, установлено, что в тканях с высокой скоростью метаболизма (печень, почки, легкие, тонкий кишечник, семенники, яичники) концентрация трития выше, чем в тканях с низкой скоростью метаболизма (кожа, мышцы, костная ткань) [23, 24].

Аэрогенно и через кожу поступление ³H составляет 15-20 %, алиментарным путем 80-85 %. Согласно заключениям экспертов, ³H является основным радионуклидом, формирующим эффективную дозу облучения биологического объекта [9]. После алиментарного поступления ³H в течение короткого времени равномерно распределяется в водной фазе организма. Изотоп хорошо поглощается живыми тканями, в которых стимулирует мутагенные изменения за счет бета-излучения и нарушения молекулярных связей в результате замещения изотопов ²Ннейтральными изотопами гелия (²Не), который образуется в результате распада ³H. Органически связанный ³H находится в безуглеродных цепочках O–H или N–H, возможно замещение ²H водорода в сульфгидрильных (S–H), амидных соединениях и аминогруппах (N–H) на ³H [8, 9, 25].

Органически связанный тритий действует непосредственно на ДНК и медленно выводится из организма (21-550 дней), представляет собой более высокий фактор риска, чем НТО. Органически связанный ³Hнаиболее опасен для яйцеклетки и эмбриона в течение первых восьми недель беременности. Попадая внутрь эмбриона, тритиевая вода и органически связанный тритий облучают быстро делящиеся клетки, повышая риск возникновения врожденных дефектов [9].

Таким образом, можно заключить, что содержание ³H в объектах окружающей среды в настоящее время достаточно высокое, при этом изотоп относится к группе биологически активных радионуклидов, и ³H влияет на все уровни организации биологического организма [26].

Радиопротекторные препараты предоставляют защиту организма при действии ионизирующего излучения, в основном предохраняют кроветворные ткани от негативного воздействия.

Различают по действию быстрые (1-2 часа) и пролонгированные (7-10 суток) препараты. Выделяют радиопротекторы,рекомендуемые при острой лучевой болезни, препараты от субклинических доз и вещества с низкой противолучевой активностью, используемые для снижения последствийоблучения. Эффект противолучевой защитывыявлен у вакцин, адаптогенов, иммуномодуляторов, гормональных средств, нуклеиновых кислот, микроэлементов. Радиопротекторное действие вакцин (тетравакцины, БЦЖ и др.) обусловлено повышением устойчивости организма к инфекционным заболеваниям. Механизм биозащитыадаптогенов (прополис, мумие, и др.) заключается в ослаблении морфологических и биохимических проявлений стресса, снижении интенсивности пролиферативных реакций, увеличении иммунологической реактивности организма [5, 27].

Вагин К.Н. установил, что однократная подкожная инъекция радиозащитного микробного препарата РЗК в дозе 1×10⁹ КОЕ/кг живой массы кроликам и овцам за 1-30 суток до и через 1-30 суток после летального облучения оказывает лечебно-профилактическое действие, обеспечивает 70-80% защиту от смерти. Радиопротекторное действие препарата РЗК основано на ингибировании синтеза иммунотоксических агентов и недоступности клеток-мишеней [28].

Хонг Ли с соавторами провели работу на мышах и культивируемых клетках, подвергшихся воздействию HTO (18,5 МБк/ кг). Установлено, что внутрижелудочное введение водородной воды (HRW) способствует выведению трития с мочой, снижает его уровень в сыворотке крови и ослабляет генетические повреждения клеток крови. Предварительная обработка HRW снижает накопление трития в обработанных HTO клетках AHH-1 β-лимфоцитов крови [29]. Ожидается, что HRW будет эффективным средством удаления радиоактивных веществ за счет конкурирующего эффекта изотопного обмена или радиозащитным средством за счет удаления свободных радикалов, вызванных воздействием HTO [29, 30, 31].

Самыми распространёнными и эффективными радиопротекторными препаратами среди сероазотсодержащих органических соединений, меркаптоалкиламинов, являются гаммафос, АЭТ, МЭА, меркамин, тизанидин. Среди распространённых радиопротекторных средств, наиболее известен цистамин

Цистамин (препарат РС-1) - бис-(β-аминоэтил)-дисульфида гидрохлорид. В экспериментах на животных демонстрирует высокую противолучевую эффективность [32]: однократная пероральная доза для мышей составляет 500-600 мг/кг, для крупного рогатого скота – 6-7 г. Недостатком является кратковременное действие и высокие дозы, близкие к токсическим, оказывает отрицательное влияние на центральную нервную систему, сердечно сосудистую и дыхательную системы и желудочно-кишечный тракт [33].

Диэтилстильбэстрол (ДЭС) – синтетический эстроген,предложен к использованию как препарат долгосрочной защиты от радиации, эффект начинается на 2-3день после введения, является потенциальным канцерогеном.

Фосфадитилэтаноламин предложен как радиопротектор, применяемый в терапии заболеваний с явлениями гемолиза различной этиологии, его инъецируют внутрибрюшинно или ректально, однократно, в дозировке 37,5 мг/кг массы тела за 15 или 30 мин до или после воздействия, имеет низкую эффективность. Однако малая эффективность и ограниченность области применения этого соединения обусловлена тем, что он относится к группе препаратов пострадиационного терапевтического действия.

Нафтизин-2-(α-нафтилметилимидазолина нитрат) – радиопротектор кратковременного действия, оптимальная дозировка – 0,3 мг/кг., обладает высокой противолучевой эффективностью (85%). Нафтизин обладает высокой противолучевой эффективностью, защищая от гибели до 85% собак, подвергнутых гамма-облучению в абсолютно летальных дозах.

Индралин (Б-190) является прямым альфа-адреномиметиком. Механизм действия заключается в спазмировании сосудов и изменении циркуляции кровоснабжения в радиочувствительных органах и тканях, в результате чего возникает защищающая гипоксия. Индралин является экстренным препаратом, защита длится в течение 1 часа при внешнем облучении, используется в чрезвычайных ситуациях и авариях. Увеличение концентрации препарата в крови приводит к спазму сосудов и гипоксии радиочувствительных органов и тканей, в результате возможно развитие гипоксии головного мозга и других органов. Увеличение концентрации препарата в крови приводит к спазму сосудов и гипоксии радиочувствительных органов и тканей, в результате возможно развитие гипоксии головного мозга и других органов.

Куркумин– препарат для повышения радиорезистентности организма, рекомендован в дозе 3,125-3,47 мг чистого вещества куркумина на 1 кг массы. Вводится внутримышечно в дозе 10,0 см³через 30 минут после облучения, при поглощенной дозе 4,0-5,0 Гри дополнительно в дозе 10,0 см³на 3-тьи и 5-ые сутки после облучения при достижении поглощенной дозы 5,0-6,0 Гр.

Эффективным биологическим препаратом является водный экстракт зелени пихты сибирской для профилактики развития лучевой болезни. Установлена радиопротекторная эффективность водного экстракта при воздействии ионизирующего излучения на крыс. Для профилактики лучевой болезни за 30-35 суток до облучения рекомендовано введение экстракта с рационом или водой однократно в дозе 8,0-10,0 мл/кг [34].

Муслимова З. Г. и Азизов И. В. установили,установили, что облучение семян в высоких дозах повышает содержание в них перекиси водорода, супероксидного и гидроксильного радикалов, активируетперекисное окисление липидов и, вероятно, вызывает активацию антиоксидантной системы растений, что снижает всхожесть семян. Предварительная обработка семян пшеницы гуминовыми комплексами разных металлов (Na, K, Fe) снижает действие ионизирующего излучения на всхожесть семян и рост растений, подавляет активацию перекисного окисления липидов и тем самым защищает растения от разрушительного действия радиации[35].

Пухова Г. Г. с соавторами провели исследование по изучению радиопротекторных свойств гумата натрия, для крыс, при облучении кобальтом (⁶⁰Co) в дозе 193,5 мГр/кг. В работе установлено радиопротекторное действие «Гумат натрия», применение препарата увеличивает продолжительность жизни облученных крыс [36].

БельдинВ.Е. раскрывает механизм адсорбирующего действия гуминовых кислот в организме животных при действии микотоксинов. Молекулы гуминовых кислот прикрепляются к поверхности животной клетки и выполняют функцию фильтра, который связывает тяжёлые металлы, образует комплексы со свободными радикалами, образующимися в плазматической мембране в результате перекисного окисления липидов, Таким образом, 1 грамм гуминовых кислотимеет адсорбирующую емкость по изотопам: цезий – 30 мг, стронций – 18 мг; свинец – 60-100 мг; хром –80 мг; ртуть – 300 мг. Гуминовые вещества способствуют образованию защитного слоя на слизистых оболочках кишечника в результате препятствуют проникновению бактерий и вирусов во внутреннюю среду организма[37].

Саенко А.Г. с соавторами оценили радиопротекторной действие препарата «Гумат натрия» при воздействии изотопов цезия (¹³⁷Cs) и ртути (²⁰³Hg) на организм крыс. «Гумат натрия» получали из гуминовых кислот окисленного бурого угля. Установлен радиопротекторный эффект гумата натрия при введении в воду в дозировке 200мг/л. У самцов белой крысы, через сутки после введения радиопротектора выявилась тенденция к снижениюудельной активности ¹³⁷Cs и ²⁰³Hg в организме, на 3 и 5 сутки применения препарата «Гумат натрия» установлено достоверное снижение содержания ¹³⁷Cs и ²⁰³Hg в организме крыс [38]. Настоящей задачей радиационной защиты живых организмов является получение препаратов и определение их дозировки, способствующей защите от негативного воздействия ионизирующего излучения.

Предполагается, что воздействие радиации в субклинических дозах на многоклеточный организм не вызывает нарушения системных функций, но может изменять физиологические процессы на клеточном и тканевом уровнях, а также трансформировать гомеостаз организма. Оценка биоэффектов малых доз в настоящее время представляет научный интерес. В связи с этим существует необходимость определения радиобиологических эффектов, возникающих в организме животных при воздействии малых доз радиации. В связи с увеличением удельной активности трития в объектах окружающей среды, изучение тритиевого воздействия на организм животных, подбор препаратов с радиопротекторным действием являются актуальными.

Данная работа продолжение исследований по оценке субклинических доз ионизирующего излучения на организм сельскохозяйственных животных и на клетки крови в опытах «invitro». Ранее авторами установлено влияниеионизирующего излучения в дозах5 мГр, 50 мГр и 500 мГр на биохимические показатели при облучении образцов периферической крови крупного рогатого «invitro» [39], определены изменения гематологических, биохимических показателей крови коров при облучении «invitro» проб крови в дозах 4-5 мГр [40], оценена степень изменений показателей периферической крови овец при воздействии поглощенной дозы в 1,6 мГр/год [41].

Цель исследования – оценить радиопротекторные свойства препарата «Гумат калия 80» при тритиевом воздействии в субклинических дозах на организм кроликов. Для достижения цели, решены следующие задачи: определение измененийгематологических и биохимических показателей и фагоцитарной активности клеток крови кроликов при воздействии тритиевой воды и при применении радиопротектора «Гумат калия 80». Проведение оценки радиопротекторных свойств «Гумат калия 80» при тритиевом воздействии в субклинических дозах.

Объекты и методы.Эксперимент проведен в 2023 году на кафедре внутренних незаразных болезней, акушерства и физиологиисельскохозяйственных животных института прикладной биотехнологии и ветеринарной медицины, в научно-исследовательском информационном центре Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования Красноярского государственного аграрного университета.

Исследования проведены на трех группах кроликов калифорнийской породы: опытная группа (10 голов), контрольная – 15 голов, интактный (токсический) контроль – 10  голов. Средний возраст кроликов – 12 ± 0,3 мес., вес – 4 ± 0,5кг. Клиническое исследование проводили посредством общего клинического осмотра, термометрии и аускультации, исследования выполнены по общепринятой методике.

Кровь для исследования отбирали из краевой ушной вены в утренние часы в вакуумные пробирки с натрий-гепарином и активатором свертываемости. На первом этапе кролики опытной и интактной группы в течение 30 дней получали НТО, в результате у животных сформирована субклиническая доза 62,29 мГр. Животные получали НТО вместе с питьевой водой через индивидуальные нипельные поилки. Контроль дозы осуществляли внесением НТО в небольшое количество воды с последующим разбавлением в  объеме воды для поения (менее 300 мл) одного кролика. На втором этапе кроликам опытной группы в течение 20 дней совместно с НТО задавался радиопротектор «Гумат калия 80» в дозе 10^-4г/л, который вносили в воду перед дачей кроликам. Контроль изменений в периферической крови проводили на 8, 13 и 20 сутки применения радиопротектора.Расчет поглощенной дозы внутреннего облучения при тритиевом воздействии проводили согласно методике, разработанной на кафедре радиохимии, в лаборатории радионуклидов и меченых соединенийхимического факультета МГУ имени М.В.Ломоносова. Доза D формировалась по закону D=0tP0ⅇ-λtⅆt  (1)

где P₀ – мощность дозы в начальный момент, λ  – константа, характеризующая скорость выведения НТО. Полная аналогия с постоянной распада, поэтому обозначается этот коэффициент тоже λ . Так как постоянная распада трития намного меньше, чем константа, характеризующая биологическое выведение, то постоянной распада можно пренебречь.

Решением данного уравнения будет функция:

D=p0λ1-ⅇ-λt   (2)

Для случая полного выведения нуклида из организмаt→∞ .

Dmax=P0λ (3)

Так как удобно пользоваться вместо постоянной полувыведения периодом полувыведения, то заменяем выражения (2) и (3) на следующие:

D=P0T1∕2ln21-0,5t∕T1∕2 (4)

Dmax=p0T1∕2ln2 (5)

Мощность дозы в начальный момент времени будет равна:

P0=εA∕m (6)

Никаких дополнительных коэффициентов не требуется, если мощность дозы в единицах: [Гр/с = Дж/(кг/с)], средняя энергия на распад [Дж/расп], активность в организме [Бк = расп/с], масса животного [кг].

Перевод средней энергии распада из эВ в Дж:

ε=5700эВрасп*1,6*10-19 ДжэВ=9,12*10-16Джрасп (7).

Фагоцитарная активность лейкоцитов крови определялась путем введения в пробы крови «invitro» частиц латекса, опсонизированных белками пуловой сыворотки кроликов, при окраскегенцианвиолетом. Оценивали активность фагоцитов микроскопией (увеличение ×40) в камере Горяева, подсчитывали 100 фагоцитов. Количество форменных элементов крови (лейкоциты, эритроциты) проводили методом микроскопии в камере Горяева по стандартным методикам [42]. Содержание гемоглобина определяли на спектрофотометре «ПЭ-5400УФ» гемиглобинцианиднымунифицированным методом с использованием реагента гемоглобин-ольвекс.

Результаты и их обсуждение.«Гумат калия 80» (humicacid, калиевая соль гуминовых кислот), химическая формула – C₉H₈K₂O₄представляет собой порошок чёрного цвета, хорошо растворим в воде,pH 9-11. Гуминовые кислоты – сложная смесь высокомолекулярных природных органических соединений, образующихся при разложении отмерших растений под воздействием микроорганизмов. Химические процессы при гумификации протекают таким образом, что с течением времени образуются стойкие соединения, способные противостоять дальнейшим изменениям и минерализации. Процесс образования гуминовых кислот связан с биохимической деятельностью бактерий и низших грибов, а углеводы прямого участия в нем не принимают. Источниками гуминовых кислот является лигнин и его предшественники [43].

Кролики опытной (подвергавшиеся воздействию ВТО) и контрольной групп подвергались клиническому обследованию. Физиологические показатели кроликов контрольной группы на протяжении всего исследования находились в пределах нормы: температура тела – 38 ± 0,3 °С; частота дыхания – 43 ± 4 раза/мин; частота сердечных сокращений – 173 ± 8 уд/мин; масса – 4,45 ± 0,35 кг; упитанность – средняя; состояние тела – расслабленное; телосложение – правильное, пропорциональное; костяк – крепкий; кожа – эластичная, чистая; волосяной покров – блестящий, без повреждений и облысения, гладкий, густой, хорошо удерживается в волосяных фолликулах. Реакция на внешнее раздражение адекватная; зрачки подвижные, блестящие, увлажненные; нос мягкий, эластичный, теплый, слегка влажный; слизистая оболочка розовая; волосы вокруг носовых ходов сухие; уши чистые, безболезненные, без повышения местной температуры, расчесов нет; зубы желтоватые, целые, прикус правильный; перкуссия придаточных пазух носа — ясный коробочный звук (экссудата нет); слизистые оболочки бледно-розовые, влажные, без наложений и изъязвлений; гортань и трахея безболезненны; легкие чистые, без хрипов, тип дыхания грудно-брюшной, дыхание ритмичное, легочный звук ясный, брюшная стенка безболезненна. Лимфатические узлы: подчелюстные, предлопаточные, коленных складок — безболезненные, округло-овальные, подвижные, эластичные, без повышения местной температуры. В ходе исследования отмечены следующие изменения клинических показателей параметров опытной группы кроликов: учащенное дыхание – 59 ± 3 раза/мин, увеличение частоты сердечных сокращений – 225 ± 7 уд/мин. Однако показатели статистически не отличались от нормы.

Периферическая кровь является динамичной и чувствительной тканью в организме животных к воздействию факторов окружающей среды, в том числе к ионизирующему излучению. Количество эритроцитов в периферической крови кроликов при действии НТО увеличивалось на 1,41×10¹²/л (P ≤0,001). В присутствии радиопротектора «Гумат калия 80»содержание эритроцитов в опытной группе постепенно снижалось, однако при этом превышало значения контроля: на 8 сутки на 1,26 ×10¹²/л (P ≤0,01), на 13 сутки 1,30×10¹²/л(P ≤0,001)(табл. 1). Количество эритроцитов в периферической крови в опытных группах на 8 и 13 сутки превышало референсные значения, к 20 дню применения препарата «Гумат калия 80» количество эритроцитов снизилось и вернулось в диапазон значений контроля и референсных значений.

Таблица 1

Гематологические показатели

Примечание: * P ≤0,05, **P ≤0,01; ***P ≤0,001 в отношении к контролю; ◊ P ≤0,05; ◊◊ P ≤0,05; ◊◊◊ P ≤0,001 в отношении к интактному контролю

Содержание лейкоцитов при действии НТО увеличивалось на 1,96×10⁹/л (интактный контроль). Применение радиопротектора в течение 13 дней снижало количество лейкоцитов, однако наблюдался лейкоцитоз 8 сутки(P ≤0,01) и 13 сутки (P ≤0,001) относительно контроля. На 20 сутки исследования содержание лейкоцитов в периферической крови кроликов пришло в норму и соответствовало диапазону значений контрольной группы.

Количество гемоглобина при действии НТО возрастало на 55,28г/л (P ≤0,001). Применение «Гумат калия 80» на 8 сутки достоверно снижалоуровень гемоглобина по сравнению с контролем (P ≤0,01) и интактным контролем (62,29мГр) (P ≤0,001), на 13 сутки применения радиопротектора установлено достоверное снижение гемоглобина на 61,33 г/л по отношению к интактному контролю (62,29мГр) (P ≤0,001). На 20 сутки применения радиопротектора количество гемоглобина уменьшилось на 64,86 г/л (P ≤0,001) по отношению к интактному контролю. На 13 и 20 сутки использования радиопротектора содержание гемоглобина вернулось в диапазон контрольных и референсных значений.

Используя иммунологический метод, выявлено достоверное снижение фагоцитарной активности на 8 сутки применения «Гумата калия 80» на 12,18 % (P ≤0,001) относительно данных контрольной группы и на 11,75% (P ≤0,001) по сравнению со значениями интактной группы,рис. 1. Применение радиопротектора резко увеличивает фагоцитарную активность клеток крови. На 13 сутки использования препарата «Гумат калия 80» фагоцитарная активность превышала на 9,28% (P ≤0,001) данные контрольной группы и на 9,71 % (P ≤0,001) показатели интактного контроля. На 20 сутки применения радиопротектора наблюдалось снижение фагоцитарной активности относительно результатов полученных на 13 сутки, однако значение превышало на 3,36% (P ≤0,001) данные контроля и на 3,79 % (P ≤0,01) показатели интактной группы.

Рис. 1. – Фагоцитарная активность: * P ≤0,05; ** P ≤0,05; *** P ≤0,001 в отношении к контролю; ◊◊ P ≤0,05; ◊◊◊ P ≤0,001 в отношении к интактному контролю (62,29мГр).

Снижение фагоцитарной активности является негативным фактором и свидетельствует о ослаблении иммунобиологической активности организма из-за воздействия трития, однако применение гуматов приводит к восстановлению фагоцитарной способности клеток крови организма кроликов.

Биохимические показатели сыворотки крови позволяют получить сведения о метаболизме органических и минеральных веществ в организме. Оценка биохимических показателей является универсальным методом определения функциональной активности органов и систем организма. Установлено, что наиболее информативными являлись следующие биохимические показатели: концентрация альфа- и бета-глобулинов, АСТ, АЛТ; содержание щелочной фосфатазы и концентрация фосфора.

При действии НТО в сыворотке крови кроликов снижается на 55,83% (P ≤0,001) количество альфа-глобулинов. Применение «Гумат калия 80» вызывает достоверное увеличение количества альфа-глобулинов в сыворотке крови кроликов на 8 сутки на 1,49% относительно контроля (P ≤0,05), на 5,05% относительно интактного контроля (62,29мГр) (P ≤0,001), рис.2.

Рис.2. Содержание альфа-глобулинов в сыворотке крови кроликов: * P ≤0,05; ** P ≤0,05; *** P ≤0,001 в отношении к контролю; ◊ P ≤0,05; ◊◊ P ≤0,05; ◊◊◊ P ≤0,001 по отношению к интактному контролю (62,29мГр)

На 13 сутки использования радиопротектора содержание альфа-глобулинов увеличилось на 3,86% (P ≤0,001), на 20 сутки – на 3,39% (P ≤0,001)относительно интактного контроля. На 13 и 20 сутки применения радиопротектора содержание альфа-глобулинов возвращалось в пределы контроля, что говорит о восстановлении иммунной функции организма и печени.

Количествобета-глобулиновв сыворотке крови кроликов при действии НТО увеличивается. Применение радиопротектора «Гумат калия 80» снижало содержание бета-глобулинов: на 8 сутки на – 2,89% (P ≤0,01), на 13 сутки на – 1,37% (P ≤0,05)относительно интактного контроля (62,29мГр), рис.3.

Рис.3.Количество бета-глобулинов в сыворотке крови кроликов: ◊ P ≤0,05; ◊◊ P ≤0,05; ◊◊◊ P ≤0,001 в отношении к интактному контролю (62,29мГр).

Содержание бета-глобулинов в присутствии радиопротектора восстанавливалось до значений контроля к 20суткам применения, что свидетельствует о восстановлении резистентности организма к инфекционным заболеваниям.

Концентрация аланинаминотрасферазы (АЛТ) в сыворотке крови при действии НТО резко возрастает в 3,14 раза (P ≤0,001) относительно контрольной группы. При применении препарата «Гумат калия 80» содержание АЛТ достоверно снижалось: на 8 сутки исследования на 1,22 ммоль/(л×ч) (P ≤0,001), на 13 сутки – на 1,42 ммоль/(л×ч) (P ≤0,001) и 20 сутки – на 1,74 ммоль/(л×ч) (P ≤0,001) относительно интактного контроля (62,29мГр), рис.4.

Рис. 4. Количество АЛТ в сыворотке крови кроликов: * P ≤0,05; ** P ≤0,05; *** P ≤0,001 в отношении к контролю; ◊ P ≤0,05; ◊◊ P ≤0,05; ◊◊◊ P ≤0,001 в отношении к интактному контролю (62,29мГр)

Содержание АЛТ к 20 дню применения радиопротектора возвращалось в пределы контрольных значений, что можно объяснить восстановлением гепатоцитов после повреждающего действия НТО.

При воздействии тритиевой воды – интактный контроль установлено снижение (P ≤0,05) содержания АСТ в сыворотке крови кроликов, рис.5. На 8 сутки использования «Гумат калия 80» в сыворотке крови снижалось количество аспартатаминотрансферазы относительно контроля (P ≤0,001) и интактной группы (P ≤0,01). Применение радиопротектора на 13 сутки увеличивает содержание АСТ в сыворотке крови, к 20 дню количество АСТ возвращалось в пределы контрольных значений, что свидетельствует о восстановлении функции гепатоцитов.

Рис. 5. Количество АСТ в сыворотке крови кроликов: * P ≤0,05; ** P ≤0,05; *** P ≤0,001 в отношении к контролю; ◊ P ≤0,05; ◊◊ P ≤0,05; ◊◊◊ P ≤0,001 в отношении к интактному контролю (62,29мГр)

Содержание щелочной фосфатазы при применении «Гумат калия 80» достоверно снижалось в сыворотке крови кроликов на 8 сутки – на 119,42 ммоль/(л×ч) (P ≤0,001), на 13 сутки – на 53,57 ммоль/(л×ч) (P ≤0,01) относительно интактного контроля, рис. 6.

Рис. 6.Количество щелочной фосфатазы в сыворотке крови: * P ≤0,05; ** P ≤0,05; *** P ≤0,001 в отношении к контролю; ◊ P ≤0,05; ◊◊ P ≤0,05; ◊◊◊ P ≤0,001 в отношении к интактному контролю (62,29мГр).

Применение радиопротектора на 20 сутки возвращало содержание щелочной фосфатазы в значения контрольной группы, что свидетельствует о восстановлении функции печени.

Таким образом можно заключить что действие тритиевой воды в субклинических дозах на организм кроликов изменяет биохимические показатели. Действие НТО в дозе (62,29мГр) в сыворотке крови снижает количество альфа-глобулинов, АСТ ищелочной фосфатазы, при этом одновременно увеличивает содержание бета-глобулинов и АЛТ. На 20 сутки применения радиопротектора  «Гумат калия 80» достоверно увеличивается количествоальфа-глобулинов и АСТ. Препарат к 20 суткам применения в сыворотке крови кроликов снижает до уровня контроля содержаниебета-глобулинов, АЛТ и щелочной фосфатазы. Восстановление биохимических показателей свидетельствует о восстановлении функции гепатоцитов, нефронов после действия НТО и увеличении резистентности организма.

Заключение. ВоздействиеНТО в русле крови вызывает эритроцитоз, лейкоцитоз и увеличение уровня гемоглобина, что связано с стимулирующим действием трития на организм кроликов. Действие НТО в дозе (62,29мГр) снижает количество альфа-глобулинов, АСТ, щелочной фосфатазы и увеличивает содержание бета-глобулинов и АЛТ что свидетельствует о нарушении функции печени и почек. Применение радиопротектора «Гумат калия 80» на 20 день восстанавливает количество форменных элементов крови, биохимические показателикрови кроликов до контрольных значений.В качестве радиопротектора рекомендуется использование «Гумат калия 80» в дозе 10^-4 г/л при тритиевом воздействии.

Список источников

1. Уткин С. С. Обоснование решений по долговременной безопасности крупных хранилищ жидких радиоактивных отходов:дис. д-р. техн. наук: 05.14.03. / Уткин Сергей Сергеевич – M., 2016. – 220 с.
2. Абрамов, А.А. Основы радиохимии и радиоэкологии: методическое руководство к курсу Основы радиохимии и радиоэкологии / А.А. Абрамов, Г.А. Бадун – Москва – Баку: Филиал Химического факультета МГУ имени М.В. Ломоносова, 2011 г. – 138 с.
3. Агданцева Е. Н. Исследование адаптивной реакции популяции дрожжевых клеток на действие ионизирующего излучения / Е. Н. Агданцева, А. А. Баранова, И. Н. Бажукова // Тезисы докладов IV Междунар. молодежной науч. конф.–  Екатеринбург: УрФУ, 2017.  C. 162-163.
4. Асаенок, И.С. Радиационная безопасность: учеб. пособие для студ. техн. спец. / И.С. Асаенок, А.И. Навоша. – Минск, 2004.
5. Басова, М. А. Дозиметрия внутреннего облучения крупного рогатого скота радиоактивными изотопами йода: дис. магистр.: 03.04.02 / Басова Мария Андреевна – Обнинск, 2021. – 91 с.
6. Бондарева, Л.Г. Закономерности распределения и уровни воздействия антропогенных загрязнений на речную экосистему: автореф. дисс. д-ра биол. наук: 03.02.08 / Бондарева Лидия Георгиевна – Москва, 2020. – 36 с.
7. Васянович М.Е., Екидин А.А., Крышев и др. Воздействие на население радиоактивного излучения от H-3 и C-14, поступающего в атмосферу с выбросами АЭС России // В кн.: VIII съезд по радиационным исследованиям. Москва, Россия, 2021; 374.
8. Барчуков, В.Г. Формирование современных подходов к оценке радиационной безопасности трития и его соединений / В.Г. Барчуков, О.А. Кочетков // VIII Съезд по радиационным исследованиям: тезисы докладов – Москва: Объединенный институт ядерных исследований. – 2021. – С. 366.
9. Ливанцова, С. Ю. Техногенный тритий в окружающей среде / С. Ю. Ливанцова, В. В. Снакин // Жизнь Земли. – 2014. – Т. 35-36. – С. 261-269. – EDN ZDIPPD
10. Hayashida, K. Inhalation of hydrogen gas reduces infarct size in the rat model of myocardial ischemia-reperfusion injury. / К. Hayashida, М. Sano, I. Ohsawa et al. // BiochemBiophys Res Commun. – 2008. – V. 373. – Р.5-30.
11. Юхимчук, А. А. Тритиевая наука и технологии в России / А. А. Юхимчук // Химическая промышленность сегодня. – 2019. – № 3. – С. 40-47.
12. Комочков, М. М. Дозиметрия ионизирующих излучений: учебное пособие для студентов ВУЗа / М. М. Комочков. – М.: ФИЗМАТЛИТ, 2006.– 44 с.
13. Коротовских О. И. Влияние малых доз ионизирующего излучения на биологические объекты: магистер. дис. / О. И. Коротовских. – Уральский федеральный университет имени первого Президента России Б. Н. Ельцина. Екатеринбург, 2020. — 63 с. — Библиогр.: с. 60-63 (36 назв.)
14. Горшкова, Т. А. Особенности проявления адаптивной реакции дрожжевых клеток на действие ионизирующего излучения / Т. А. Горшкова, Л. Н. Комарова, Н. М. Кабакова, В. Г. Петин. // Пятый съезд по радиационным исследованиям: тез. докл. –2006. –Т. 1. – С. 144.
15. Атлас Восточно-Уральского и Карачаевского радиоактивных следов, включая прогноз до 2047 года / под ред. Ю.А. Израэля. – М.: ИГКЭ Росгидромета и РАН, Фонд «Инфосфера» – НИА-Природа, 2013. – 140 с.
16. Жигарев, А. А. Влияние ионизирующего излучения на организм кроликов. Обзор литературы / А. А. Жигарев // Инновационные тенденции развития российской науки: мат-лы XV Междунар. науч.-практ. конф. молодых ученых – Красноярск: Красноярский ГАУ, 2022. – С. 155-157
17. Кириллов, В.Ф. Радиационная гигиена / В.Ф. Кириллов, Е.Ф. Черкасов – М.: Медицина – Москва 2012 – 246 c.
18. Baeeri, M. Molecular and biochemical evidence on the protective role of ellagic acid and silybin against oxidative stress-induced cellular aging. / М. Baeeri, S. Mohammadi-Nejad, M. Rahimifard et al. // Mol Cell Biochem. – 2018 – V. 441. Р. 21- 33.
19. Фокин, А.Д. Сельскохозяйственная радиология: учебник для вузов / А.Д. Фокин, А.А.Лурье, С.П. Торшин – М.: Дрофа, – 2005. – 367с
20. Чеботина, М. Я. Поступление трития на земную поверхность с дождевыми осадками / М. Я. Чеботина, О.А., Николин, Е.Л. Мурашова // ВХР. – 2012. – №5.
21. Бурмистров Д.Е. Влияние наночастиц оксидов металлов, заключенных в полимеры, на жизнеспособность прокариотических и эукариотических клеток: автореф. дис. канд. биол. наук: 1.5.2 / Бурмистров Дмитрий Евгеньевич – M., 2023. –  26 с.
22. Balonov, M. I. Tritium radiobiological effects in mammals: review of experiments of the last decade in Russia / M. I. Balonov, K. N. Muksinova, G. S. Mushkacheva // Health physics. – 1993. – Т. 65. – №. 6. – P. 713-726.
23. Pietrzak-Flis, Z. Tritium in rabbits after ingestion of freeze-dried tritiated food and tritiated water. / Z. Pietrzak-Flis, I, Radwan, L. Indeka // Radiat Res. – 1978.– Nov 76(2). – Р.420.
24. Pietrzak-Flis, Z.Effect of lifetime intake of organically bound tritium and tritiated water on the oocytes of rats / Z. Pietrzak-Flis,M. Wasilewska-Gomułka // Radiation and environmental biophysics. – 1984. – Т. 23. – №. 1. – P. 61-68.
25. Iketani M, Ohsawa I. Molecular hydrogen as a neuroprotective agent. CurrNeuropharmacol  2017– V.15– Р.24–31.
26. Hodgson, A. Doses from the consumption of Cardiff Bay flounder containing organically bound tritium / A. Hodgson, J. E. Scott, T. P. Fell [et al.] // Journal of radiological protection. – 2005. – Т. 25. – №. 2. – P. 149.
27. Гребенюк, А.Н. Практическое руководство по использованию медицинских средств противорадиационной защиты при чрезвычайных ситуациях и обеспечению ими аварийных медико-санитарных формирований и региональных аварийных центров / А.Н.Гребенюк, В.И. Легеза , В.Д. Гладких , А.А., Тимошевский,  В.Б.Назаров. Науч.-производ. центр «Фармзащита» Федер. мед.-биол. аг-ва России. – М. : Комментарий, 2015. – 304 с.
28. Вагин, К.Н. Разработка противорадиационного защитного препарата на основе веществ микробного происхождения: дис. д-р биол. наук: 06.02.05, 03.01.01 / Вагин Константин Николаевич – Чебоксары, 2020. – 286 с.
29. Hong, Li Hydrogen-rich water attenuates the radiotoxicity induced by tritium exposure in vitro and in vivo / Li. Hong, Li Rong, Yin Yaru et al. // ExpTher Med. – 2021. V. 11:2590. – Р.34–45 .
30. Ноговицына, Е. И. Активные формы кислорода и низкодозовое влияние трития на бактериальные клетки: магистерская диссертация: 03.04.02 / Ноговицына Елена Ивановна – Красноярск: СФУ, 2019. – 53 с.
31. Серебряный, А. М. О механизме адаптивного ответа. Оценка способности лимфоцитов крови человека к радиационному адаптивному ответу с помощью разных критериев / А. М. Серебряный, М. М. Антощина, А. В. Алещенко [и др.] // Цитология. – 2008. – Т. 50. – №. 5. – С. 462.
32. Булдаков, Л.А. Радиационное воздействие на организм – положительные эффекты / Л.А. Булдаков, В.С. Калистратова. – Москва :Информ–Атом, 2005. – 247 с.
33. Жолобова, М.В. Средства индивидуальной защиты животных при чрезвычайных ситуациях техногенного характера / М.В. Жолобова,И.Э. Липкович, К.В. Лемешко // Инновации. Наука. Образование. – 2023. – № 72 (январь). – С. 16-17.
34. Способ защиты животных от высокодозового ионизирующего излучения [Электронный ресурс] // URL: https://findpatent.ru/patent/270/2701155.html (дата обращения 20.05.2023) .
35. Муслимова, З. Г. Влияние гуматовNa, K, Fe на активность антиоксидантной системы γ-облученных проростков пшеницы / З. Г. Муслимова, И.В. Азизов // Научный журнал «Известия КГТУ», 2015г. – No36, – 7с.
36. Пухова Г.Г., Дружина Н.А., Степченко Л.М., Чеботарев Е.Е. Влияние гумата натрия на животных, облученных в летальных дозах [Effectofsodiumhumateonanimalsirradiatedwithlethaldoses]. Радиобиология. 1987. Сентябрь-октябрь; 27(5): 650-3. Русский. PMID: 2959984.
37. Бельдин, В. Е. Гуминовые кислоты как адсорбент микотоксинов / В. Е. Бельдин // Птицеводство. – 2021. – № 7-8. – С. 22-24. – EDN DUCFAQ.
38. Саенко А.Г., Лапардин М. П., Посохова А. В.,Тарасенко Г. А. Экспериментальное обоснование радиопротекторного эффекта гуматов натрия из гуминовых кислот окисленного бурого угля // Медико-биологические аспекты Рационализации питания населения На Дальнем Востоке. - Владивосток: 1995. - С. 2-3.
39. Федотова А. С., Турицына Е.Г. Влияние малых доз ионизирующего излучения при облучении invitro на показатели крови / А.С. Федотова, Е.Г. Турицына// Аграрный вестник Урала. 2024. - Т. 24 № 09. -С. 1214-1224. DOI:10.32417/1997-4868-2024-24-09-1214-1224.
40. Федотова А.С., Жигарев А.А., Макарская Г.В. Радиобиологические эффекты в периферической крови крупного рогатого скота при поглощенных дозах 4 и 5 мГр / А.С. Федотова, А.А. Жигарев, Г.В. Макарская // Ученые записки учреждения образования «витебская ордена «Знак почета» Государственная академия ветеринарной медицины. 2022. - Т.58, выпуск 3. - С. 65-73. DOI 10.52368/2078-0109-2022-58-3-65-73.
41. Федотова А.С. Изменение показателей периферической крови овец при действии малых доз ионизирующего излучения / А.С. Федотова // Вестник РГАТУ, 2022, т.14, №4. С83-89. DOI: 10.36508/RSATU.2022.19.47.012
42. Смолин, C.Г. Физиология системы крови: методические указания/ С.Г. Смолин, Краснояр. гос. аграр. ун-т. – Красноярск, 2014.-С.24-26.–
43. Гуминовая кислота калия (C9H8K2O4) // Интернет-магазин GreenAgrolab URL: https://greenagrolab.ru/products/guminovaya-kislota-kaliya-c9h8k2o4---10-gramm (дата обращения: 11.10.2024).

Reference

1. Utkin S. S. Justification of solutions for long-term safety of large liquid radioactive waste storage facilities:.doctor of technical sciences: 05.14.03. / Utkin Sergey Sergeevich - M., 2016. - 220 p.
2. Abramov, A.A. Fundamentals of radiochemistry and radioecology: a methodological guide to the course Fundamentals of radiochemistry and radioecology / A.A. Abramov, G.A. Badun - Moscow - Baku: Lomonosov Moscow State University, 2011. - 138 p.
3. Agdantseva E. N., Baranova A. A., Bazhukova I. N. Investigation of the adaptive response of yeast cell populations to ionizing radiation. // Abstracts of the IV International Conference. Youth Scientific Conference– Yekaterinburg: UrFU, 2017. pp. 162-163.
4. Asayenok, I.S. Radiation safety : textbook. manual for technical students. spec. / I.S. Asayenok, A.I. Navosha. Minsk, 2004.
5. Basova, M. A. Dosimetry of internal irradiation of cattle with radioactive isotopes of iodine: dis. Master's degree: 04/03/02 / Basova Maria Andreevna – Obninsk, 2021. – 91 p.
6. Bondareva, L.G. Patterns of distribution and levels of anthropogenic pollution impact on the river ecosystem: abstract. Dissertation of the Doctor of Biology: 02/03/08 / BondarevaLidiyaGeorgievna – Moscow, 2020. – 36 p.
7. Vasyanovich M.E., Yekidin A.A., Kryshev et al. The impact of overpopulation of radioactive radiation from H-3 and C-14 entering the atmosphere with emissions from Russian nuclear power plants // In: VIII Congress on Radiation Research. Moscow, Russia, 2021; 374 p.
8. Barchukov, V.G. Formation of modern approaches to assessing the radiation safety of tritium and its compounds / V.G. Barchukov, O.A. Kochetkov // VIII Congress on Radiation Research: abstracts of reports – Moscow: Joint Institute for Nuclear Research. – 2021. – p. 366.
9. Livantsova, S. Y. Technogenic tritium in the environment / S. Y. Livantsova, V. V. Snakin // Life of the Earth. – 2014. – Vol. 35-36. – pp. 261-269. – EDN ZDIPPD.
10. Hayashida, K. Inhalation of hydrogen gas reduces infarct size in the rat model of myocardial ischemia-reperfusion injury. / K. Hayashida, M. Sano, I. Ohsawa et al. // BiochemBiophys Res Commun. – 2008. – V. 373. – Pp.5-30.
11. Yukhimchuk, A. A. Tritium science and technology in Russia / A. A. A. Yukhimchuk // Chemical industry today. - 2019. - № 3. - Pp. 40-47.
12. Komochkov, M. M. Dosimetry of ionizing radiation: textbook for students of higher education / M. M. Komochkov. - M. :Fizmatlit, 2006. 44 p.
13. Korotovskikh O. I. Influence of small doses of ionizing radiation on biological objects: master's thesis / O. I. Korotovskikh. - Ural Federal University named after the first President of Russia B. N. Yeltsin. N. Yeltsin. Ekaterinburg, 2020. - 63 p. - Bibliogr.:Pp. 60-63 (36 names).
14. Gorshkova, T. A. Peculiarities of manifestation of adaptive response yeast cells to the action of ionizing radiation / T. A. Gorshkova, L. N. Komarova, N. M. Kabakova, V. G. Petin. // Fifth Congress on Radiation research : abstracts of reports -2006. -T. 1. - P. 144.
15. Atlas of the East Ural and Karachay radioactive traces, including forecast up to 2047 / edited by Yu.A. Izrael. - Moscow: IGCE Roshydromet. and RAS, Infosphere Foundation - NIA-Priroda, 2013. - 140 p
16. Zhigarev, A. A. Effect of ionizing radiation on the organism of of rabbits. Literature review / A. A. Zhigarev // Innovative trends in the development of Russian science: mat-lys of the XV International scientific-practical conference of young scientists. of the Russian science: proceedings of the XV International Scientific and Practical Conference of Young Scientists - Krasnoyarsk: Krasnoyarsk GAU, 2022. - Pp. 155-157.
17. Kirillov, V.F. Radiation hygiene / V.F. Kirillov, E.F. Cherkasov - M.: Medicine - Moscow 2012 - 246 p.
18. Baeeri, M. Molecular and biochemical evidence on the protective role of ellagic acid and silybin against oxidative stress-induced cellular aging. / M. Baeeri, S. Mohammadi-Nejad, M. Rahimifard et al. // Mol Cell Biochem. – 2018 – V. 441. P. 21- 33.
19. Fokin, A.D. Agricultural radiology: textbook for higher education institutions / A.D. Fokin, A.A. Lurie, S.P. Torshin - M.: Drofa, - 2005. – 367 p.
20. Chebotina, M.Ya. Tritium transfer to the Earth surface with rain precipitation / M. Y. Chebotina, O. A., Nikolin, E. L. Murashova // VHR. - 2012. - №5.  URL: https://cyberleninka.ru/article/n/postuplenie-tritiya-na-zemnuyu-poverhnost-s-dozhdevymi-osadkami (circulation date: 13.02.2025).
21. Burmistrov D.E. The effect of metal oxide nanoparticles enclosed in polymers on the viability of prokaryotic and eukaryotic cells: abstract of the dissertation of the cand. Biol. sciences: 1.5.2 / Burmistrov Dmitry Evgenievich – M., 2023. – 26 p.
22. Balonov, M. I. Tritium radiobiological effects in mammals: review of experiments of the last decade in Russia / M. I. Balonov, K. N. Muksinova, G. S. Mushkacheva // Health physics. – 1993. – T. 65. – №. 6. – P. 713-726.
23. Pietrzak-Flis, Z. Tritium in rabbits after ingestion of freeze-dried tritiated food and tritiated water. / Z. Pietrzak-Flis, I, Radwan, L. Indeka // Radiat Res. – 1978.– Nov 76(2). – Р.420.
24. Pietrzak-Flis, Z.Effect of lifetime intake of organically bound tritium and tritiated water on the oocytes of rats / Z. Pietrzak-Flis,M. Wasilewska-Gomułka // Radiation and environmental biophysics. – 1984. – T. 23. – №. 1. – Pp. 61-68.
25. Iketani M, Ohsawa I. Molecular hydrogen as a neuroprotective agent. CurrNeuropharmacol  2017– V.15– P.24–31.
26. Hodgson, A. Doses from the consumption of Cardiff Bay flounder containing organically bound tritium / A. Hodgson, J. E. Scott, T. P. Fell [et al.] // Journal of radiological protection. – 2005. – T. 25. – №. 2. – P. 149.
27. Grebenyuk A.N., Legeza V.I., Gladkikh V.D., Timoshevsky A.A., Nazarov V.B. Practical guidance on the use of medical radiation protection equipment in emergency situations and their provision to emergency medical units and regional emergency centers. Scientific and production Pharmaceutical Protection Center Federal Medical Center-biol. ag-va of Russia. – M. : Commentary, 2015. – 304 p.
28. Vagin, K.N. Development of an anti-radiation protective drug based on substances of microbial origin: dis. Doctor of Biology: 02/06/05, 01/03/2011 / Vagin Konstantin Nikolaevich – Cheboksary, 2020. – 286 p.
29. Hong, Li Hydrogen-rich water attenuates the radiotoxicity induced by tritium exposure in vitro and in vivo / Li. Hong, Li Rong, Yin Yaru et al. // ExpTher Med. – 2021. V. 11:2590. – P.34–45 .
30. Nogovitsyna, E. I. Reactive oxygen species and the low-dose effect of tritium on bacterial cells: Master's thesis: 04/03/02 / Nogovitsyna Elena Ivanovna – Krasnoyarsk: SibFU, 2019. – 53 p.
31. Serebryany, A.M. On the mechanism of adaptive response. Assessment of the ability of human blood lymphocytes to radiation adaptive response using various criteria / A.M. Serebryany, M. M. Antoshchina, A.V. Aleshchenko [et al.] // Cytology. - 2008. – Vol. 50. – No. 5. – p. 462.
32. Buldakov, L.A. Radiation effects on the body – positive effects / L.A. Buldakov, V.S. Kalistratova.  Moscow : Inform–Atom Publ., 2005. 247 p.
33. Zholobova, M.V. Personal protective equipment for animals in man-made emergencies / M.V. Zholobova,I.E. Lipkovich, K.V. Lemeshko // Innovation. Science. Education. – 2023. – No. 72 (January). – Pp. 16-17.
34. Method of protection of animals from high-dose ionizing radiation [Electronic resource] // URL: https://findpatent.ru/patent/270/2701155.html (date of circulation 20.05.2023)
35. Muslimova, Z. G. The effect of humate, K, Fe on the activity of the antioxidant system of gamma-irradiated wheat seedlings / Z. G. Muslimova, I.V. Azizov // Scientific journal "Izvestiya KSTU", 2015 – No36, – 7 p.
36. Pukhova G.G., Druzhina N.A., Stepchenko L.M., Chebotarev E.E. Effect of sodium humate on animals irradiated with lethal doses [Effect of sodium humate on animals irradiated with lethal doses]. Radiobiology. 1987. September-October; 27(5): 650-3. Russian. PMID: 2959984.
37. Beldin, V. E. Humic acids as adsorbent of mycotoxins / V. E. Beldin // Poultry farming. - 2021. - № 7-8. – Pp.. 22-24. - EDN DUCFAQ.
38. Saenko A. G., Lapardin M. P., Posokhova A. V.,Tarasenko G. A. Experimental substantiation of the radioprotective effect of sodium humates from humic acids of oxidized brown coal // Medico-biological aspects of Rationalization of nutrition of the population in the Far East. - Vladivostok: 1995. - P. 2-3.
39. Fedotova A. S., Turitsyna E.G. The effect of small doses of ionizing radiation during invitro irradiation on blood parameters / A.S. Fedotova, E.G. Turitsyna // Agrarian Bulletin of the Urals. 2024. Vol. 24 No. 09. pp. 1214-1224. DOI:10.32417/1997-4868-2024-24-09-1214-1224.
40. Fedotova A.S., Zhigarev A.A., Makarskaya G.V. Radiobiological effects in peripheral blood of cattle at absorbed doses of 4 and 5 mGr / A.S. Fedotova, A.A. Zhigarev, G.V. Makarskaya // Scientific Notes educational institutions "Vitebsk Order of the Badge of Honor" State Academy of Veterinary Medicine. 2022. Vol.58, issue 3. - Pp. 65-73. DOI 10.52368/2078-0109-2022-58-3-65-73.
41. Fedotova A.S. Changes in sheep peripheral blood parameters under the action of low doses of ionizing radiation / A.S. Fedotova // Bulletin of RGATU, 2022, vol.14, No. 4. – Pp. 83-89. DOI: 10.36508/RSATU.2022.19.47.012
42. Smolin, S.G. Physiology of the blood system: methodological guidelines/ S.G. Smolin, Krasnoyarsk State Agrarian University. un-T.  Krasnoyarsk, 2014. - Pp.24-26.
43. Humic acid of potassium (C9H8K2O4) // GreenAgrolab Online Store URL: https://greenagrolab.ru/products/guminovaya-kislota-kaliya-c9h8k2o4---10-gramm (date of request: 11.10.2024).

1. Уткин С.С. Обоснование решений по долговременной безопасности крупных хранилищ жидких радиоактивных отходов: дис. … д-ра техн. наук. M., 2016. 220 с.

2. Абрамов А.А., Бадун Г.Г. Основы радиохимии и радиоэкологии. М.; Баку, 2011. 138 с.

3. Агданцева Е.Н., Баранова А.А., Бажукова И.Н. Исследование адаптивной реакции популяции дрожжевых клеток на действие ионизирующего излучения. В сб.: IV Международная молодежная научная конференция. Екатеринбург: УрФУ, 2017. C. 162–163.

4. Асаенок И.С., Навоша А.И. Радиационная безопасность: учебное пособие. Минск, 2004. 105 с.

5. Басова М.А. Дозиметрия внутреннего облучения крупного рогатого скота радиоактивными изотопами йода: магистерская дис. Обнинск, 2021. 91 с.

6. Бондарева Л.Г. Закономерности распределения и уровни воздействия антропогенных загрязнений на речную экосистему: автореф. дис. … д-ра биол. наук. М., 2020. 36 с.

7. Васянович М.Е., Екидин А.А., Крышев А.И., и др. Воздействие на население радиоактивного излучения от H-3 и C-14, поступающего в атмосферу с выбросами АЭС России. В сб.: VIII съезд по радиационным исследованиям. М., 2021. С. 374.

8. Барчуков В.Г., Кочетков О.А. Формирование современных подходов к оценке радиационной безопасности трития и его соединений. В сб.: VIII съезд по радиационным исследованиям. Москва: Объединенный институт ядерных исследований. 2021. С. 366.

9. Ливанцова С.Ю., Снакин В.В. Техногенный тритий в окружающей среде // Жизнь Земли. 2014. Т. 35-36. С. 261–269. EDN: https://elibrary.ru/ZDIPPD

10. Hayashida K., Sano М., Ohsawa I., et al. Inhalation of hydrogen gas reduces infarct size in the rat model of myocardial ischemia-reperfusion injury // Biochem Biophys Res Commun. 2008. Vol. 373, № 1. Р. 30–35. DOI:https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2008.05.165.

11. Юхимчук А.А. Тритиевая наука и технологии в России // Химическая промышленность сегодня. 2019. № 3. С. 40–47. EDN: https://elibrary.ru/WRIPNQ.

12. Комочков М.М. Дозиметрия ионизирующих излучений: учебное пособие. Дубна, 2006. 76 с. EDN: https://elibrary.ru/QMJFGB.

13. Коротовских О.И. Влияние малых доз ионизирующего излучения на биологические объекты: магистерская дис. Екатеринбург: Уральский федер. ун-т им. первого Президента России Б.Н. Ельцина, 2020. 63 с.

14. Горшкова Т.А., Комарова Л.Н., Кабакова Н.М., и др. Особенности проявления адаптивной реакции дрожжевых клеток на действие ионизирующего излучения. В сб.: Пятый съезд по радиационным исследованиям. Т. 1. М., 2006. С. 144.

15. Израэль Ю.А., ред. Атлас Восточно-Уральского и Карачаевского радиоактивных следов, включая прогноз до 2047 года. М., 2013. 140 с.

16. Жигарев А.А. Влияние ионизирующего излучения на организм кроликов. Обзор литературы. В сб.: XV Международная научно-практическая конференция молодых ученых «Инновационные тенденции развития российской науки». Красноярск: Красноярский ГАУ, 2022. С. 155–157. EDN: https://elibrary.ru/REGRHT.

17. Кириллов В.Ф., Черкасов Е.Ф. Радиационная гигиена. М.: Медицина, 2012. 246 c.

18. Baeeri M., Mohammadi-Nejad S., Rahimifard M., et al. Molecular and biochemical evidence on the protective role of ellagic acid and silybin against oxidative stress-induced cellular aging // Mol Cell Biochem. 2018. Vol. 441, № 1-2. Р. 21–33. DOI:https://doi.org/10.1007/s11010-017-3172-0. EDN: https://elibrary.ru/YDNCKT.

19. Фокин А.Д., Лурье А.А., Торшин С.П. Сельскохозяйственная радиология: учебник. М.: Дрофа, 2005. 367 с. EDN: https://elibrary.ru/QKWZSN.

20. Чеботина М.Я., Николин О.А., Мурашова Е.Л. Поступление трития на земную поверхность с дождевыми осадками // Водное хозяйство России. 2012. № 5. С. 77–87. EDN: https://elibrary.ru/PEIEWL.

21. Бурмистров Д.Е. Влияние наночастиц оксидов металлов, заключенных в полимеры, на жизнеспособность прокариотических и эукариотических клеток: автореф. дис. … канд. биол. наук. M., 2023. 26 с. EDN: https://elibrary.ru/WVDSTU.

22. Balonov M.I., Muksinova K.N., Mushkacheva G.S. Tritium radiobiological effects in mammals: review of experiments of the last decade in Russia // Health physics. 1993. Vol. 65, № 6. P. 713–726. DOI:https://doi.org/10.1097/00004032-199312000-00009. EDN: https://elibrary.ru/XOGROU.

23. Pietrzak-Flis Z., Radwan I., Indeka L. Tritium in rabbits after ingestion of freeze-dried tritiated food and tritiated water // Radiat Res. 1978. Vol. 76, № 2. Р. 420–428. DOI:https://doi.org/10.2307/3574790.

24. Pietrzak-Flis Z., Wasilewska-Gomułka M. Effect of lifetime intake of organically bound tritium and tritiated water on the oocytes of rats // Radiation and environmental biophysics. 1984. Vol. 23, № 1. P. 61–68. DOI:https://doi.org/10.1007/BF01326737.

25. Iketani M., Ohsawa I. Molecular hydrogen as a neuroprotective agent. Curr Neuropharmacol. 2017. Vol. 14, № 4. Р. 24–31. DOI:https://doi.org/10.2174/1570159X14666160607205417. EDN: https://elibrary.ru/FWTLSF.

26. Hodgson A., Scott J.E., Fell T.P., et al. Doses from the consumption of Cardiff Bay flounder containing organically bound tritium // Journal of radiological protection. 2005. Vol. 25, № 2. P. 149. DOI:https://doi.org/10.1088/0952-4746/25/2/003.

27. Гребенюк А.Н., Легеза В.И., Гладких В.Д., и др. Практическое руководство по использованию медицинских средств противорадиационной защиты при чрезвычайных ситуациях и обеспечению ими аварийных медико-санитарных формирований и региональных аварийных центров. М.: Комментарий, 2015. 304 с.

28. Вагин К.Н. Разработка противорадиационного защитного препарата на основе веществ микробного происхождения: дис. … д-ра биол. наук. Чебоксары, 2020. 286 с.

29. Li H., Li R., Yin Ya., et al. Hydrogen-rich water attenuates the radiotoxicity induced by tritium exposure in vitro and in vivo // J Radiat Res. 2021. Vol. 62, № 1. Р. 34–45. DOI:https://doi.org/10.1093/jrr/rraa104. EDN: https://elibrary.ru/JAXIIP.

30. Ноговицына Е. И. Активные формы кислорода и низкодозовое влияние трития на бактериальные клетки: магистерская дис. Красноярск: СФУ, 2019. 53 с.

31. Серебряный А.М., Антощина М.М., Алещенко А.В., и др. О механизме адаптивного ответа. Оценка способности лимфоцитов крови человека к радиационному адаптивному ответу с помощью разных критериев // Цитология. 2008. Т. 50, № 5. С. 462–466. EDN: https://elibrary.ru/JSAZDJ.

32. Булдаков Л.А., Калистратова В.С. Радиационное воздействие на организм – положительные эффекты. Москва: Информ-Атом, 2005. 247 с.

33. Жолобова М.В., Липкович И.Э., Лемешко К.В. Средства индивидуальной защиты животных при чрезвычайных ситуациях техногенного характера // Инновации. Наука. Образование. 2023. № 72 (январь). С. 16–22. EDN: https://elibrary.ru/BNLNVM.

34. Способ защиты животных от высокодозового ионизирующего излучения [Электронный ресурс] // Доступно по: https://findpatent.ru/patent/270/2701155.html. Ссылка активна на 20.05.2023.

35. Муслимова З.Г., Азизов И.В. Влияние гуматов Na, K, Fe на активность антиоксидантной системы γ-облученных проростков пшеницы // Известия КГТУ. 2015. № 36. С. 126–132. EDN: https://elibrary.ru/TIIIIN.

36. Пухова Г.Г., Дружина Н.А., Степченко Л.М., и др. Влияние гумата натрия на животных, облученных в летальных дозах // Радиобиология. 1987. Т. 27, № 5. С. 650–653. EDN: https://elibrary.ru/XDIZIT.

37. Бельдин В.Е. Гуминовые кислоты как адсорбент микотоксинов // Птицеводство. 2021. № 7-8. С. 22–24. EDN: https://elibrary.ru/DUCFAQ.

38. Саенко А.Г., Лапардин М.П., Посохова А.В., и др. Экспериментальное обоснование радиопротекторного эффекта гуматов натрия из гуминовых кислот окисленного бурого угля. В сб.: Медико-биологические аспекты рационализации питания населения на Дальнем Востоке. Владивосток,1995. С. 2–3.

39. Федотова А.С., Турицына Е.Г. Влияние малых доз ионизирующего излучения при облучении in vitro на показатели крови // Аграрный вестник Урала. 2024. Т. 24, № 9. С. 1214–1224. DOI:https://doi.org/10.32417/1997-4868-2024-24-09-1214-1224. EDN: https://elibrary.ru/NRSDIG.

40. Федотова А.С., Жигарев А.А., Макарская Г.В. Радиобиологические эффекты в периферической крови крупного рогатого скота при поглощенных дозах 4 и 5 мГр // Ученые записки учреждения образования «Витебская ордена «Знак почета» Государственная академия ветеринарной медицины». 2022. Т. 58, вып. 3. С. 65–73. DOI:https://doi.org/10.52368/2078-0109-2022-58-3-65-73. EDN: https://elibrary.ru/QDESLM.

41. Федотова А.С. Изменение показателей периферической крови овец при действии малых доз ионизирующего излучения // Вестник РГАТУ. 2022. Т. 14, № 4. С. 83–89. DOI:https://doi.org/10.36508/RSATU. 2022.19.47.012. EDN: https://elibrary.ru/LMYBXW.

42. Смолин C.Г. Физиология системы крови: методические указания. Красноярск, 2014. С. 24–26.

43. Гуминовая кислота калия (C9H8K2O4) // Интернет-магазин GreenAgrolab. Доступно по: URL: https://greenagrolab.ru/products/guminovaya-kislota-kaliya-c9h8k2o4---10-gramm. Ссылка активна на 11.10.2024.