Введение. Мастит представляет собой серьезную проблему в ветеринарной практике. Заболеваемость маститом и его этиология зависят от климатических условий, сезонных колебаний, типа подстилки, плотности размещения животных и методов содержания [1–4].

Мастит у коров возникает из-за механического, термико-химического и биологического воздействия на вымя, что приводит к проникновению патогенных бактерий. На развитие заболевания влияют нарушения содержания, кормления и гигиены доения, системные заболевания, гормональные нарушения, наследственная предрасположенность и неисправные доильные аппараты. Все формы мастита, как клинические, так и скрытые, негативно влияют на физико-химические свойства и санитарно-гигиенические показатели молока [5, 6].

Основной путь возникновения мастита – проникновение микробов в сосок через сосковый канал. Распространенные возбудители – стрептококки, стафилококки и кишечные палочки. Резервуары инфекции могут быть как контагиозные, так и экологические [7, 8].

Наибольшее экономическое значение имеют субклинические локальные воспаления и легкие клинические случаи мастита, так как они могут приводить к агалактии и даже к системным поражениям, включая смерть животных [9, 10]. Задачи ветеринарных специалистов заключаются в мониторинге возбудителей мастита [11], выведении животных с генетической и иммунологической устойчивостью к заболеванию и контроле условий содержания [11–12].

Лечение мастита традиционно осуществляется с использованием противомикробных препаратов, иммуномодуляторов, эфирных масел и гуммипротекторов, однако вопрос их безопасности и экономичности остается открытым [13]. В последние годы в ветеринарной практике внедряется концепция доказательной медицины, которая акцентирует внимание на научно обоснованных методах лечения, основанных на клинических исследованиях [14, 15]. Неправильное применение противомикробных средств может привести к недостаточной эффективности терапии и развитию антибиотикорезистентности, что угрожает как здоровью животных, так и безопасности потребителей [16, 17].

Контроль остаточных количеств антибиотиков в молоке и мясе является важной частью государственной программы обеспечения безопасности продуктов питания. Превышение допустимых норм может вызвать серьезные последствия для здоровья человека и привести к экономическим потерям производителей [18]. Поэтому необходимо сотрудничество между владельцами скота и ветеринарами для разработки эффективных протоколов лечения [19].

Цель исследований – анализ современных методов профилактики и лечения мастита, направленных на повышение резистентности стада, оптимизацию терапевтических схем и улучшение условий содержания для минимизации экономических потерь.

Объекты и методы. В данной работе проведен обзор литературы, основанный на анализе научных баз данных, включая PubMed, Scopus, Web of Science, Google Scholar, Consensus, Library Genesys и Z-library. Внимание уделялось фармакокинетическим и фармакодинамическим характеристикам противомикробных препаратов, используемых для лечения мастита у крупного рогатого скота.

Для анализа были рассмотрены следующие параметры: биохимические характеристики препаратов, их растворимость и степень ионизации в тканях вымени, а также свойства связывания с белками сыворотки молока. Сравнительный анализ двух методов введения препаратов – интра-маммарной инфузии (IMM) и системного введения – осуществлялся с целью выявления различий в скорости достижения терапевтических концентраций в молоке и тканях вымени.

Протоколы лечения, описанные в литературе, разрабатывались на основе бактериологической диагностики и анализа эпизоотической ситуации, что подчеркивает важность индивидуального подхода к каждому случаю мастита. В работе также акцентируется внимание на необходимости внедрения систем управления качеством и механизмов обратной связи, соответствующих стандартам ГОСТ ИСО 9001-2015.

Исследования авторами проводились с соблюдением всех норм биоэтики и ветеринарных стандартов. Методология лечения, как правило, основывалась на бактериологической диагностике с определением чувствительности к антимикробным препаратам. При этом учитывались национальные и международные рекомендации по применению противомикробных и иммунотропных средств, а также использовались стандартизированные протоколы лечения, основанные на принципах доказательной ветеринарной медицины.

Для стандартизации процессов внедрялись электронные протоколы лечения в соответствии с ГОСТ Р ИСО / МЭК 17025, что позволяло авторам оптимизировать терапевтические схемы, контролировать качество ветеринарных услуг и рационально использовать противомикробные препараты, снижая риск развития антибиотикорезистентности.

Объектом исследования являлся крупный рогатый скот молочного направления продуктивности.

Результаты и их обсуждение

Виды микроорганизмов и причины инфицирования

Лечение мастита у коров должно быть комплексным, направлено на подавление микрофлоры, повышение защиты молочной железы, устранение болезненности и отечности. Подбор лекарств индивидуален: один и тот же антибактериальный препарат может быть эффективен в одном хозяйстве, но не работать в другом. Эффективность терапии зависит от ранней диагностики и своевременного начала лечения [19, 20]. За исключением Mycoplasma spp., которые могут передаваться от коровы к корове воздушно-капельным путем и проникать в вымя, заразное распространение патогенов происходило во время доения через такие пути, как руки дояра или вкладыши доильного аппарата (например, Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae и Corynebacterium bovis) [21].

Кроме того, при инфицировании вымени не происходила передача инфекции из-за адаптации факторов вирулентности Escherichia coli, не выявляли высокую концентрацию бактерий Trueperella и частых фактов заражения водорослями Prototheca zopfii [22, 23].

Основным источником патогенов является подстилка, загрязненные растворы для сосков, инфузии вымени, вода, используемая для подготовки вымени перед доением, пруды с водой или грязевые ямы, повреждения кожи, травмы сосков и мухи [23].

Для обнаружения субклинического мастита у коров используют анализ молока на количество соматических клеток, Калифорнийский тест и другие методы. Увеличение этого показателя говорит о воспалительном процессе в молочной железе, что приводит к снижению качества молока и молочной продуктивности животных (концентрации SCC ≥ 200 000 клеток/мл) [24, 25].

Клинический мастит у коров проявляется воспалением вымени, изменениями в молоке (появляются хлопья, гной, кровь) и общими признаками болезни. Субклинический мастит протекает без симптомов, снижает удой и качество молока, обнаруживается только при лабораторных исследованиях [26].

В мировом масштабе наблюдается тенденция к увеличению размеров животноводческих хозяйств и доли производства молока в крупных стадах. Параллельно растет потребность в привлечении наемного персонала, включая иностранных работников, для обеспечения ключевых производственных процессов, в частности доения коров [27]. Зоотехники фермы и практикующие ветеринары часто имеют ограниченные знания в области управления наемным персоналом, что может приводить к нарушению предписанных инструкций и непоследовательному соблюдению протоколов.

Эпидемиология субклинического мастита

Мастит имеет широкое распространение, и его регистрировали у 5–38 % животных. В течение года до 68 % коров в стаде могут переболевать маститом, а некоторые животные могут заражаться два раза и более. Исторически борьба сосредоточена в отношении заразных патогенов, таких как S. agalactiae и S. aureus, а также на других грамположительных кокках, в первую очередь на Streptococcus dysgalactiae и Streptococcus uberis, энтерококках и стафилококках (Staphylococcus hyicus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus xylosus и S. intermedius), а также грамотрицательных палочках (Klebsiella sp., Serratia marcescens, Pseudomonas aeruginosa), Candida spp. и Prototheca zopfii. Из-за увеличения размера стад патогенами, часто вызывающими мастит, были признаны Mycoplasma spp., особенно Mycoplasma bovis [8].

Наиболее уязвимы к заражению лактирующие коровы. Основной источник инфекции – молочная железа, заражение происходит во время доения через руки персонала или доильное оборудование. В теплых климатических условиях нетели могут инфицироваться стафилококками и стрептококками еще до отела, что вызывает дерматит соска из-за активности роговой мухой Haematobia irritans, которая может нести S. aureus. Для S. agalactiae, S. aureus и неауреусных штаммов сезонные колебания частоты инфекций незначительны или отсутствовали [28]. Современные принципы антимикробной терапии включают применение антибактериальных препаратов только на основании данных бактериологического посева и выявленной чувствительности к препаратам. Во время курса применения антибиотиков бессмысленно производить отбор проб для бактериологического исследования; тестирование должно проводиться до начала лечения.

Терапия субклинического мастита

Терапия субклинического мастита должна основываться на затратах на лечение, при этом профилактика всегда предпочтительнее. Ключевым методом выявления мастита является Калифорнийский тест, который определяет количество соматических клеток в молоке. При мастите это количество увеличивается. Этот тест считается наиболее простым и распространенным методом диагностики [29]. Также проводится исследование на нарушение иммунной функции лейкоцитов в молочной железе [30].

Бактериальная диагностика важна, и отсрочка терапии не приведет к существенным экономическим потерям. При хроническом мастите точность прогнозирования эффективности лечения на основании лабораторных тестов ограничена вследствие выраженных фиброзных изменений и формирования абсцессов в тканях молочной железы. Cложность представляют случаи длительной инфекции, затрагивающие несколько четвертей вымени и ассоциированные с резистентными патогенами – в таких ситуациях терапевтический ответ маловероятен [31]. Тем не менее при субклиническом мастите, вызванном Str. agalactiae, возможно достижение высоких показателей излечения (свыше 70 %) при условии системной антимикробной терапии всего инфицированного поголовья [32].

Для лечения мастита рекомендуется использовать специализированные коммерческие препараты для внутривыменного введения, содержащие амоксициллин, пенициллин или цефалоспорины. Применение препаратов из многодозовых флаконов не рекомендовано ввиду более низкого уровня стерильности по сравнению с коммерческими средствами. Обязательным условием является соблюдение строгих правил асептики при введении лекарственных средств [33].

При проведении терапии против S. agalactiae необходим регулярный мониторинг эффективности лечения путем определения количества соматических клеток и проведения бактериологических исследований молока. Оптимальным считается контроль с интервалом в 30 дней. Не отвечающих на лечение животных следует изолировать или выбраковывать. Важно сохранять дезинфекцию сосков после доения для предотвращения повторного инфицирования стада.

Большинство стрептококков демонстрируют чувствительность к бета-лактамам и другим антимикробным препаратам. Однако инфекции, вызванные S. uberis и dysgalactiae, требуют особого подхода – наиболее эффективно лечение в конце лактации и сухостойный период. Инфекции, вызванные лактококками и энтерококками, зачастую резистентны к терапии [34].

Эффективность инфузионной терапии при хронических формах мастита, вызванных S. aureus, остается невысокой (менее 20 % случаев успешного лечения). Повышение результативности терапии хронического субклинического мастита возможно при комбинированном применении парентерального и местного лечения. Для достижения полной элиминации возбудителя необходима длительная системная терапия продолжительностью не менее одной-полутора недель. Такой подход снижает риск формирования остаточных количеств антибиотиков в молоке у сухостойных животных. Липофильные антимикробные средства, например окситетрациклин (дозировка 10–15 мг/кг в сутки), демонстрируют хорошее проникновение в ткани молочной железы. Однако следует учитывать, что краткосрочное применение окситетрациклина может оказаться недостаточно эффективным [35].

При хроническом инфицировании может возникать агалактия, в таких случаях рекомендуется выбраковка животных или высушивание зараженной четверти с продолжением доения коровы. Это также может быть полезно для генетических исследований высокопродуктивных коров. Цель состоит в устранении инфекции и снижении риска заражения других коров, а также в сохранении качества молока с низким содержанием SCC. Эти методы являются паллиативными и лучше их не допускать в профилактике инфекций.

Лечение мастита у сухостойных коров

В период прекращения лактации молочная железа претерпевает комплексную трансформацию, включающую биохимические, клеточные и иммунологические модификации. Процесс инволюции паренхимы инициируется спустя 1–2 сут после завершения лактационного периода и продолжается 10–14 сут. Данный период характеризуется двойственной природой: с одной стороны, железа демонстрирует повышенную восприимчивость к новым инфекциям, с другой – формирует неблагоприятную среду для патогенных микроорганизмов. Это делает сухостойный период оптимальным для комбинированного применения антимикробной терапии в сочетании с иммуномодулирующим воздействием, что экономически более целесообразно по сравнению с лечением лактирующих животных. Для терапии сухостойных коров разработаны специализированные коммерческие препараты, включающие пенициллин, клоксациллин, цефапирин, цефтиофур и новобиоцин. Стандартная дозировка предусматривает однократное введение препарата в каждую четверть вымени непосредственно после завершения доения. Повторное инфузионное введение не рекомендуется; при необходимости пролонгации терапии следует применять системные препараты. Основная терапевтическая задача заключается в элиминации существующих субклинических инфекций и профилактике новых случаев инфицирования [36].

После антимикробных инфузий применяются внутренние герметики для сосков, которые снижают риск новых инфекций на 50 % по сравнению с антимикробной терапией. Это особенно важно при низкой молочной продуктивности в сухостойный период, так как повышенная выработка молока задерживает инволюцию, оставляя каналы сосков открытыми. Соблюдение асептических принципов является обязательным условием при проведении любой интрамаммарной инфузии. Строгие меры предосторожности необходимы для предотвращения контаминации и развития ятрогенных инфекций [37].

BDCT-протокол (обработка всех четвертей вымени у всего поголовья) на протяжении более полувека остается фундаментальным методом контроля мастита в молочном животноводстве. Данная стратегия зарекомендовала себя как эффективное профилактическое мероприятие в борьбе с маститом [37]. Однако картина мастита изменилась: снизилась распространенность S. agalactiae и S. aureus, а патогены из окружающей среды стали более значимыми. Традиционные профилактические стратегии преимущественно направлены против грамположительных кокков, которые не всегда являются доминирующими патогенами в конкретном стаде. Значительный эффект демонстрируют комплексные меры, включающие оптимизацию условий содержания, качества подстилки, кормления животных, а также применение защитных средств для сосков. В качестве альтернативы тотальной обработке (BDCT) предлагается SDCT – селективная терапия, предусматривающая лечение только инфицированных сухостойных коров. Выбор оптимальной стратегии зависит от эпидемиологической ситуации в стаде, что требует индивидуального подхода к разработке терапевтической программы [37].

Стада с базовым уровнем мастита (SCC больше 200 000 клеток/мл) не подходят для SDCT. Протоколы отбора коров для терапии должны включать клинический анамнез мастита, индивидуальный анализ SCC перед сухостоем и после отела. На крупных молочных холдингах, где важна скорость производства молока, операторы доения не успевали правильно идентифицировать клинический мастит или сцеживать молоко. Эффективность программы терапии сухостойных коров сложно оценить по молоку в первые 30–60 дней. Полезным может быть бактериальный посев образцов молока перед сухостоем или после лечения клинических случаев [37].

Применение против мастита рекомбинантных гранулоцит-колониестимуляторов

Рекомбинантный гранулоцит-колониестимулирующий фактор (rbG-CSF-PEG) применяли до отела и через сутки после. Препарат способствовал повышению количества циркулирующих полиморфноядерных лейкоцитов, потенциально усиливая иммунный ответ у животных с предрасположенностью к послеродовым инфекциям, в т. ч. маститу [38]. Однако результаты полевых исследований не выявили влияния на частоту клинических случаев мастита. Также не было обнаружено воздействия на динамику SCC в сравнении с контрольной группой. Несмотря на потенциальную способность препарата компенсировать иммунную дисфункцию в переходный период, связанную с нарушением функции полиморфноядерных лейкоцитов, он не оказывает влияния на другие патогенетические факторы, включая метаболический стресс. Важно отметить, что данный препарат не может заменить комплексные меры по управлению состоянием животных в переходный период, включающие соблюдение гигиенических норм, контроль метаболического и теплового стресса [8].

Лечение телок от мастита

У нетелей доминирующими возбудителями мастита являются стафилококки, отличные от S. aureus, характеризующиеся высокой вероятностью спонтанного выздоровления. Тем не менее в отдельных стадах регистрируется значительное распространение трудно поддающихся терапии инфекций [39, 40].

Факторы риска инфицирования включают: контаминированное молоко для выпойки телят; кожные покровы животных; для южных регионов – дерматиты сосков, вызванные укусами насекомых.

Профилактическое введение бета-лактамных препаратов в вымя за одну-две недели до предполагаемого отела демонстрирует снижение частоты мастита в период родов. Однако влияние на показатели SCC, молочную продуктивность и частоту клинических случаев мастита в период лактации демонстрирует вариабельность в зависимости от характеристик стада. Перед проведением инфузии обязательна тщательная антисептическая обработка соска для предупреждения ятрогенного инфицирования. Данная стратегия не является универсальной рекомендацией, однако может рассматриваться как вариант профилактики при распространенности мастита у первотелок в момент отела больше 20 %, особенно при преобладании стафилококковой этиологии [40].

Лечение тяжелых форм клинического мастита

Лечение клинического мастита необходимо начинать на ранней стадии заболевания, так как происходит гибель альвеолярных клеток, вырабатывающих молоко. Терапия должна быть комплексной, с постоянной и непрерывной схемой.

Главным принципом лечения тяжелых форм мастита являлась комплексность. Инвазия патогенных микроорганизмов инициирует воспалительный ответ организма, проявляющийся клиническими признаками мастита. Характер течения инфекции (клинический или скрытый) определяется длительностью инфекции, состоянием иммунитета и вирулентностью. Стратегия борьбы базируется на профилактике заболевания и элиминации патогенов из резервуаров окружающей среды. Важно отметить, что эпидемиологические аспекты и профилактические меры при клинической и скрытой форме заболевания имеют схожий характер [41–43].

При обследовании животных учитывали анамнез: сезон, возраст, фазу лактации и предшествующие случаи заболевания. На основе этих данных выявляли факторы риска развития мастита. В эффективно управляемых молочных стадах при комплексной системе профилактики регистрируется менее 1 % новых случаев клинического мастита в месяц.

Бактериологическое исследование образцов молока от коров с клиническим маститом показало, что в трети случаев патогенные микроорганизмы не выявлялись. Среди положительных посевов более 95 % составляли стрептококки, стафилококки и кишечные палочки. Также встречались неколиформные грамотрицательные палочки, грибковые и прототековые патогены.

Преобладающей причиной заболевания являлись колиформы — грамотрицательные палочки семейства Enterobacteriaceae, способные ферментировать лактозу. Большинство колиформных инфекций спонтанно элиминировались из молочной железы с минимальными клиническими проявлениями.

Колиформные инфекции молочной железы, как правило, характеризуются спонтанным разрешением с умеренно выраженными или минимальными клиническими проявлениям. При увеличении концентрации бактерий в молоке возникала тяжелая форма мастита (системные признаки поражения). Продление терапии может привести к лишнему списанию товарного молока и увеличению рисков для здоровья и иммунитета животных [44].

Тяжелая форма мастита, сопровождающаяся агалактией, значительно чаще (в 3–6 раз) приводит к летальному исходу или выбраковке животных по сравнению с маститами иной этиологии. Особую опасность представляет инфицирование клебсиеллой, которая увеличивает риск неблагоприятного исхода вдвое по сравнению с другими колиформными возбудителями.

Терапевтическая стратегия при тяжелом клиническом мастите должна в первую очередь ориентироваться на колиформные микроорганизмы с последующим учетом других потенциальных патогенов. Хотя оптимальная антимикробная терапия требует идентификации возбудителя, временные ограничения при острых случаях не позволяют провести диагностику в первые часы заболевания. Это обусловлено стремительным ростом популяции кишечной палочки в молоке, достигающим пиковых значений за несколько часов до естественного снижения вследствие миграции нейтрофилов в молочную железу [45].

Необходимость введения 30–40 л изотонического раствора коровам в течение 4-часового периода может быть затруднительна в условиях цеха. Практической альтернативой является внутривенное введение 2 л 7 % раствора NaCl, что вызывает быстрое поглощение жидкости из компартментов тела в кровоток. Затем коровам предлагают пить воду без ограничений, и, если они не выпили по крайней мере 37–45 л, то 23–32 л следует закачать в рубец [46, 47]. У коров с эндотоксическим шоком наблюдали незначительную гипокальциемию, в таком случае следует вводить подкожно (во избежание возможных осложнений при внутривенном введении) 500 мл бороглюконата кальция или назначить перорально кальциевые гели, предназначенные для перинатальной гипокальциемии. Если корова оставалась в состоянии шока, то продолжали инфузионную терапию перорально или внутривенно, используя изотонические, а не гипертонические жидкости.

На ранних стадиях заболевания маститом, особенно в случаях, вызванных кишечной палочкой, продуцирующей эндотоксин, могут быть полезны глюкокортикоиды, которые ингибируют воспалительные пути, связанные с острофазовым ответом. Дексаметазон в дозировке 30 мг при внутримышечном введении оказывает положительное влияние на состояние молочных коров: способствует уменьшению отечности молочной железы и улучшает моторику преджелудка (рубца). Важно учитывать потенциальные риски при применении препарата у стельных животных, поскольку тяжелое течение клинического мастита может самостоятельно спровоцировать прерывание стельности.

Относительно терапии инфекций, вызванных грамположительными бактериями, нет точных данных о пользе от противовоспалительной активности глюкокортикоидов. Комбинированные препараты, сочетающие противомикробные и глюкокортикоидные вещества для введения внутрь вымени, также не показали достаточной клинической пользы в сравнении с исключительно противомикробной терапией. Как правило, лечение глюкокортикоидами следует проводить только в тяжелых случаях мастита, вызванного грамотрицательными возбудителями, при условии однократного введения дозы на ранних стадиях заболевания.

В ходе исследования методов лечения острого мастита изучены различные нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП). В клинической практике применялись следующие лекарственные средства: флуниксин, меглумин, флурбипрофен, карпрофен, мелоксикам и кетопрофен.

При сравнительном анализе методов введения препаратов установлено, что системное применение НПВП демонстрирует более высокую эффективность по сравнению с пероральным приемом аспирина. При этом было выявлено, что при пероральном введении аспирина не удается достичь терапевтически значимой концентрации препарата в тканях пораженных участков [48–52]. В ходе исследования установлено, что применение анальгина у сельскохозяйственных животных находится под строгим запретом согласно регламентам FDA. Также выявлено, что для молочного скота старше 20 мес. применение фенилбутазона категорически запрещено. Нулевые показатели выявления препаратов в биоматериалах свидетельствуют об их неэффективности, что является основанием для исключения данных средств из терапевтических схем при лечении мастита у крупного рогатого скота.

Кетопрофен, изначально разработанный для ветеринарной практики в коневодстве, продемонстрировал терапевтическую эффективность и оптимальную фармакокинетику при применении у лактирующих коров. Результаты исследований позволили получить разрешение на использование препарата в ряде стран, включая США, без ограничений по использованию молочной продукции [53–56].

Согласно рекомендациям FARAD, при внутривенном или внутримышечном введении кетопрофена в дозах до 3,3 мг/кг/день установлены следующие сроки выведения: 7 дней в мясе до убоя и 24 ч в молоке. При этом максимальный срок выведения по молоку составил до 3 дней при внутримышечном введении для доз до 3,3 мг/кг/день, срок контроля по молоку – до 3 дней [36, 47].

Были изучены различные терапевтические подходы к лечению тяжелого клинического мастита. Установлено, что фармкомпания рекомендует применение флуниксина (меглюмина) для лечения данного заболевания. В ходе лабораторных испытаний флуниксин проявил терапевтическую активность в отношении основных симптомов мастита: нормализовал температуру тела, устранял признаки угнетения, стабилизировал частоту сердечных сокращений и дыхания, снижал болезненные проявления в молочной железе. Тем не менее клиническое применение препарата при остром мастите в терапевтической дозировке не оказало существенного воздействия на показатели выживаемости поголовья и уровень молочной продуктивности. Согласно нормативным требованиям, установлены следующие сроки выведения препарата: 4-дневный период до убоя животных и 36-часовой интервал для реализации молочной продукции (при условии внутривенного введения). Следует учитывать, что парентеральное введение препарата не рекомендовано ввиду сложностей прогнозирования длительности ограничений на использование животноводческой продукции [57].

При анализе антимикробной терапии выявлено, что она остается частью терапевтического режима, несмотря на второстепенное значение по сравнению с лечением эндотоксического шока. Установлено, что колиформные инфекции приводят к хроническому маститу, при этом бактериемия кишечной палочкой встречается более чем в 50 % тяжелых случаев.

Проведен сравнительный анализ эффективности различных препаратов. Так, гентамицин (500 мг внутрь вымени дважды в день) не показал значимого улучшения показателей: пиковые концентрации бактерий в молоке, продолжительность инфекции, реконвалесцентные концентрации SCC и сывороточного альбумина в молоке, ректальная температура не отличались от контрольных значений. Окситетрациклин (11 мг/кг/день внутривенно) улучшал исход болезни, а цефтиофур натрия (2,2 мг/кг/день внутримышечно) снижал смертность и улучшал восстановление молочной продуктивности.

Выявлено, что инфузия препаратов в вымя у коров с тяжелым клиническим маститом улучшает исход заболевания при колиформных и грамположительных кокковых инфекциях. Необоснованное продление антимикробной терапии сопряжено с негативными последствиями: повышенным объемом выбраковки молочной продукции и повышенным риском иммунодепрессии у животных. Для определения целесообразности продолжения лечения необходимо оценивать состояние аппетита, поведенческие характеристики и уровень молочной продуктивности [54, 58].

Лечение мастита в легкой форме

При бактериологическом исследовании образцов молока от коров с клиническим маститом в трети случаев патогенные микроорганизмы выделить не удается. Значительная часть легких форм мастита представляет собой самокупирующиеся колиформные инфекции молочной железы. Также существует группа легких клинических случаев, связанных с временными дисбалансами иммунной системы животного [59].

Курс терапии при легких клинических случаях мастита должен определяться индивидуальным анамнезом стада. Наилучшим вариантом является использование инфузий в вымя. Критерием успешной терапии здесь может быть полное излечение от патогена, но скорее всего акцент будет сделан на возвращение к получению товарного молока. В качестве лучшего показателя терапевтической эффективности следует контролировать частоту рецидивов в краткосрочной перспективе и в период лактации. Если есть рецидив мастита при отсутствии системных признаков, то повторное лечение хронического заболевания не оправдано.

В этих случаях парентеральная терапия неэффективна, она вряд ли позволит компенсировать расходы на списанное молоко и связанные с этим затраты на лечение, а также повышенный риск остаточных количеств препаратов в молоке и мясе. Клинические случаи в рецидивах, длительная продолжительность инфекции (о чем свидетельствует высокий уровень SCC или длительные периоды увеличения SCC) и инфекции, вызванные резистентными патогенами, являются наибольшими факторами риска получения неудовлетворительного терапевтического результата. Практикующие врачи должны разработать новый протокол для молочных коров, чтобы уменьшить количество ненужного лечения в случаях с низким риском, а не полагаться на продолжение безуспешной терапии или поиск «лучшего лекарства» [57–59].

При недостаточной эффективности стандартных схем лечения мастита рекомендуется продление начальной терапии вместо перехода на альтернативные препараты или увеличения их дозировок. Установлено, что значительное улучшение показателей терапии грамположительных кокков, в частности коагулазонегативных стафилококков и стрептококков, достигается путем увеличения продолжительности инфузий в пораженную четверть вымени до 8 дней вместо стандартных 2 дней. При этом критически важно было соблюдение асептических условий при обработке сосков во время длительной терапии для предотвращения внутристадного распространения инфекций [40, 41].

Перспективным направлением оптимизации терапии является внедрение протокола принятия решений на основе результатов именно бактериологического исследования. Согласно такому протоколу, лечение легкого клинического мастита приостанавливается до получения результатов посева молока (24–48 ч). При этом решение о необходимости терапии принимается индивидуально для каждого стада. Установлено, что лечение нецелесообразно в случаях отсутствия патогенных микроорганизмов, выявления грамотрицательных бактерий и обнаружения атипичных патогенов (например Pseudomonas spp.) [42–43].

Применение данного протокола позволяет сократить использование противомикробных препаратов при легкой клинической форме мастита на 50–75 % без негативного влияния на эффективность лечения, частоту рецидивов, показатели молочной продуктивности и уровень соматических клеток в молоке.

Простую бактериологическую диагностику молока, позволяющую дифференцировать грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы, можно проводить как в специализированных ветеринарных клиниках, так и на фермах при соответствующей подготовке персонала.

Лечение мастита, вызванного нетрадиционными патогенами

P. aeruginosa является причиной возникновения мастита в хозяйствах, формируя персистирующую инфекцию [44]. Микроорганизм обнаруживается в почвенно-водной среде молочных ферм: в загрязненной воде доильных залов, элементах доильного оборудования и материалах персонала [45, 46].

Нарушение асептики при обработке вымени и использование загрязненного оборудования провоцирует развитие заболевания. Клинические проявления варьируются от тяжелого сверхострого мастита с высокой летальностью до скрытых форм. Инфекция может персистировать в молочной железе на протяжении нескольких лактаций, однако возможно спонтанное выздоровление. При тяжелых формах терапия неэффективна, рекомендуется выбраковка животных [47, 48].

Trueperella pyogenes вызывает гнойные маститы у сухостойных коров и телок, особенно при летнем выпасе вблизи водоемов. Инфекция передается через мух Haematobia irritans. Заболевание характеризуется образованием зловонного гнойного экссудата. Терапия малоэффективна, пораженная четверть атрофируется. Животных с абсцессами рекомендуется направлять на убой [49, 50].

Mycoplasma spp. (преимущественно M. bovis, Mycoplasma californicum, Mycoplasma canadense, Mycoplasma bovigenitalium) вызывают тяжелые формы мастита. Инфекция чаще всего эндогенная, распространяется после респираторных заболеваний при введении в стадо новых животных. Клинические признаки включают резкое снижение молочной продуктивности с заменой секрета серозным или гнойным экссудатом. Несмотря на выраженное местное поражение, системные проявления отсутствуют [52].

Завозимые в стадо животные выступают бессимптомными носителями патогенных микроорганизмов, передающих инфекцию респираторным или интрамаммарным путем с поражением одной или нескольких долей вымени [53].

Клинические проявления характеризуются стремительным падением молочной продуктивности и заменой нормального секрета серозным или гнойным экссудатом с мелкозернистыми включениями. Примечательно, что при выраженном местном поражении молочной железы системные проявления заболевания отсутствуют. Инфекция персистировала в период сухостоя. Выявление инфицированных животных было затруднено вследствие частого бессимптомного носительства и нерегулярного выделения возбудителя с молоком [28, 54].

Терапевтические меры не обеспечивали удовлетворительного эффекта, поэтому при активных вспышках заболевания больных коров необходимо изолировать. Для выявления инфицированных животных рекомендуется регулярный осмотр наливного резервуара и молочных трубок доильных аппаратов. Особое внимание следует уделять коровам с клиническим маститом и недавно отелившимся особям. При сохранении клинических и системных проявлений мастита животных необходимо направлять на выбраковку. Особое внимание следует уделять соблюдению санитарно-гигиенических норм при доении и содержании в изоляторе. Молоко от микоплазменных коров категорически запрещено для выпойки телят во избежание развития респираторных и отологических патологий. Рекомендуется использование специализированных заменителей молока или пастеризованных продуктов [55].

Nocardia asteroides вызывает деструктивный мастит с острым течением, характеризующимся гипертермией, анорексией, кахексией и выраженным отеком молочной железы. Заболевание сопровождается развитием гранулематозного воспаления с последующим фиброзом и образованием пальпируемых узелков. Основной причиной инфицирования является нарушение асептики при терапии мастита. Зараженные животные подлежат убою [77].

Serratia spp. вызывает мастит вследствие контаминации доильного оборудования, сосков и водных источников. Микроорганизм проявляет устойчивость к дезинфицирующим средствам. Инфицированные коровы подлежат выбраковке [56].

Микотический мастит, вызванный дрожжевыми грибами, развивается на фоне длительного применения пенициллина и других антимикробных препаратов. Клиническая картина характеризуется тяжелым течением с лихорадкой. Прогноз вариабелен: возможно спонтанное выздоровление через 14 дней либо развитие хронического деструктивного мастита. При подозрении на дрожжевой мастит необходимо немедленное прекращение антибиотикотерапии [57].

Этиологический агент мастита может быть представлен кислотоустойчивыми видами Mycobacterium spp., преимущественно почвенного происхождения, такими как Mycobacterium fortuitum, Mycobacterium smegmatis, Mycobacterium vaccae и Mycobacterium phlei. Инфицирование происходило при интрамаммарном введении препаратов, содержащих антибиотики (особенно пенициллин) в масляных растворах, а также при применении средств самолечения. Клиническое течение характеризовалось умеренно выраженной симптоматикой с периодическими вспышками заболевания [56].

Еще один возбудитель мастита — Prototheca zopfii, условно-патогенный одноклеточный непигментированный микроорганизм, относящийся к водорослям. Обитает в водоемах и контаминированной почве с высоким содержанием органики. Резервуары инфекции локализуются в зонах повышенной влажности животноводческих объектов: на выгульных площадках, в местах отдыха животных, на навозных массах. Механизм заражения реализуется через контаминированную подстилку, особенно в сухостойный период, при нарушении правил асептики во время лечебных манипуляций и использовании нестерильных препаратов. При высокой заболеваемости возможно инфицирование через доильное оборудование. Факторы риска: нарушение асептики при лечебных манипуляциях; использование нестерильных препаратов; неудовлетворительное состояние подстилки и выгульных площадок. Особенность патогена — способность формировать персистирующую инфекцию с периодическими рецидивами, что требует строгого контроля и соблюдения профилактических мер [14].

Клиническая картина характеризовалась хроническим, бессимптомным течением с повышением соматических клеток в молоке (SCC). Наблюдались случаи спорадических тяжелых инфекций. Характерным являлось длительное носительство с периодическим выделением возбудителя. После первичного инфицирования культуральное исследование молока могло быть отрицательным в течение нескольких месяцев, повторное выявление происходило во время последующей лактации, преимущественно после отела. Диагностика заболевания представляла сложности при стандартном молочном культивировании, что обуславливало необходимость применения селективных сред и метода окраски по Граму для выявления более крупных, чем у бактерий, форм патогена. Клиническое течение и этиология заболевания соответствовали другим атипичным формам мастита. Терапевтические мероприятия демонстрировали низкую эффективность [58].

Мастит, ассоциированный с Bacillus spp., характеризуется идентичной этиологией и клинической картиной. Профилактика являлась приоритетным направлением контроля данных форм мастита. При выявлении хронического течения заболевания рекомендовалась выбраковка животных для предотвращения распространения инфекции в стаде [56].

Пример мастита у коз

Организмы, поражающие вымя коз, аналогичны таковым у коров. Как правило, наиболее распространенными являются коагулазо-отрицательные стафилококки, они могут вызывать стойкие инфекции, приводящие к увеличению количества SCC и низкодифференцированному маститу с повторяющимися клиническими эпизодами.

Уровень инфекции и заболеваемость маститом, вызванным Staphylococcus aureus, у молочных коз, как правило, низкие (меньше 5 %), но при этом они могут приводить к персистирующим инфекциям, без реакции на терапию. Стрептококковые инфекции могут возникать как в субклинических, так и в клинических случаях, при этом Streptococcus agalactiae является не самым распространенный возбудителем мастита у коз [62].

Микоплазменные инфекции, в первую очередь Mycoplasma mycoides и Mycoplasma putrefaciens, вызывают вспышки мастита и контагиозную агалактию. Последний возбудитель вызывает септицемию, полиартрит, пневмонию и энцефалит, а также тяжелые заболевания и смертность у козлят. Обнаружено, что Mycoplasma capricolum вызывает у коз и козлят тяжелый мастит, от которого выздоровление наступает примерно через 4 недели [16, 23, 40, 41, 44].

Возбудитель Trueperella (ранее Arcanobacterium) pyogenes вызывает множественные узловатые абсцессы вымени, признаки артрита и энцефалита коз и прогрессирующую пневмонию овец, вторичного резервуара. Часто наблюдается агалактия, а также уплотнение вымени из-за фиброза [59].

Алгоритмы бактериальной диагностики, контроля и лечения бактериальных маститов у молочных коз применяются такие же, как для крупного рогатого скота. При этом мониторинг субклинического мастита с помощью подсчета SCC у коз затруднен из-за недостоверного контраста между группами инфицированных и неинфицированных животных, особенно на более поздних стадиях лактации. Частично это может быть связано с более высокой долей эпителиальных клеток в козьем молоке, чем в коровьем. По мере развития лактации увеличивается выделение эпителиальных клеток в молоко и, таким образом, у неинфицированных самок в конце лактации часто встречаются SCC больше 1 000 000 клеток/мл [60, 61].

Для снижения распространения инфекции необходимо соблюдение надлежащих процедур доения и хорошая санитария окружающей производственной среды. Хронически инфицированных самок, а также инфицированных M. mycoides и тех, которые не выздоровели от M. putrefaciens или M. capricolum следует выбраковывать [63].

Профилактика хронического и субклинического мастита

Эффективность профилактики мастита у коров определяется корректностью проведения запуска за 45–60 дней до прекращения лактации. При суточном удое менее 3 л применялся одномоментный запуск, при удое более 5 л технологию применяли постепенно. Главными направлениями в профилактике являются следующие процессы: хозяйственные (зоогигиена), зоотехнические (пригодность к машинному доению) и санитарные (контроль за состоянием вымени), так как большее количество заболевших коров выбывают в первые несколько недель после отела.

Профилактика клинической и субклинической форм мастита базируется на минимизации микробной контаминации сосков молочной железы. Большинство случаев клинического мастита обусловлено возбудителями из окружающей среды, что требует разработки мер по снижению микробной обсемененности подстилки, лежанок и пастбищных участков.

Подготовка перед удоем включает контроль чистоты и сухости сосков, применение гермицидов при их погружении, стимуляцию сосков аппаратом доения продолжительностью 60–120 с и своевременное подключение доильных аппаратов.

Иммунопрофилактика проводится путем многократного введения препаратов в сухостойный период для снижения частоты колиформного мастита. Иммунная защита сохранялась в течение 50–60 дней после последней иммунизации [64, 65].

Критерии эффективности иммунопрофилактики включают: подтверждение присутствия колиформных микроорганизмов в стаде путем бактериологического посева, мониторинг заболеваемости (более 1 % поголовья), сбор данных о животных из группы риска, учет факторов риска и разработку индивидуального протокола вакцинации [66]. Например, недавно разработан новый протокол для вакцины, нацеленной против сидерофорных белков Klebsiella spp., которые являются фактором вирулентности для грамотрицательных патогенов, тем самым продемонстрирована перспектива снижения тяжести клинического мастита [67].

Меры по предотвращению новых инфекций предусматривали применение эффективных дезинфицирующих средств после доения, использование индивидуальных полотенец, применение перчаток для доярок, контроль работы пульсатора и регулярную аттестацию доильного оборудования согласно правилам ICAR.

Ветеринарные требования к содержанию животных включают комплекс мер по обеспечению чистоты и сухости помещений, применению неорганической подстилки преимущественно песчаного типа, регулярной замене подстилочного материала, контролю теплового стресса, уходу за выменем с удалением излишней шерсти, профилактике травм сосков, мониторингу отечности вымени, а также защите животных от насекомых и обморожений. Исследования показали связь между применением опилочной подстилки и ростом заболеваемости инфекциями Klebsiella. При этом эффективность мер по предотвращению мастита не зависит только от выбора подстилочного материала, поскольку количество патогенных бактерий определяется уровнем влажности и содержанием органических веществ в используемом материале [68].

Практические рекомендации включают необходимость избегания размещения животных на участках со скоплением воды, обеспечение правильного режима лежания, своевременную очистку доильного оборудования, исключение раздаивания коров и учет особенностей содержания животных при свободном выпасе.

Анализ фармакокинетических и фармакодинамических аспектов лечения мастита

Мастит крупного рогатого скота представляет собой комплексную патологию, требующую системного подхода к диагностике и терапии. Особенности фармакокинетики антимикробных препаратов в тканях молочной железы определяются рядом факторов: липидной растворимостью, степенью ионизации, связыванием с белками сыворотки и типом носителя. Данные характеристики существенно влияли на клиническую эффективность терапии и определяли ограничения по реализации молочной продукции из-за остаточных количеств активных веществ.

Фармакодинамика препаратов напрямую зависит от интенсивности молокоотдачи. При повышенной секреции молока наблюдали значительное снижение антимикробной активности, особенно для макролидов, тетрациклинов и котримоксазола. Препараты для лечения мастита должны обладать низкими значениями минимальной ингибирующей концентрации (МИК) в отношении возбудителя, особенно при системном введении. В условиях нарушенного фагоцитоза в молочной железе предпочтение следует отдавать бактерицидным препаратам [69].

Эффективность терапии требует предварительного определения in vitro чувствительности к препаратам, хотя активность in vitro не всегда коррелировала с эффективностью in vivo. Существенной проблемой является резистентность возбудителей мастита, особенно S. aureus к пенициллину G, что снижало показатели излечения от мастита, вызванного устойчивыми штаммами [70, 71]. До начала лечения необходимо проводить тест на β-лактамазы для определения резистентности. Коагулазо-негативные стафилококки демонстрировали более высокую устойчивость и склонность к развитию мультирезистентности по сравнению с S. aureus [70]. Стрептококки характеризуются чувствительностью к пенициллину, но резистентны к макролидам и линкозамидам по сравнению с S. aureus [72]. Чувствительность колиформных бактерий варьирует и обычно не является ограничивающим фактором при терапии [69].

Сравнительный анализ интрамаммарной инфузии и системного введения противомикробных препаратов в терапии

Лечение мастита требует тщательного выбора способов введения антимикробных препаратов. Стрептококки локализуются в молочном канале, в то время как S. aureus вызывает более тяжелые инфекции, проникая в ткани вымени. Интрамаммарное введение (IMM) является наиболее распространенным методом лечения, обеспечивая высокие концентрации действующих веществ в молоке и снижая расход препарата. Однако метод характеризовался неравномерным распределением препарата и риском инфицирования при введении через сосковый канал (табл. 1) [73].

Концентрация пенициллина G в молоке после IMM в 100–1000 раз превышала таковую при системном введении. Исследования показали достижение эффективных антибактериальных концентраций (выше МПК 0,5 мкг/г) во всех областях вымени [19]. Эффективность лечения варьировалась в зависимости от возбудителя (табл. 1), наилучший терапевтический ответ наблюдали при инфицировании стрептококками, коагулазонегативными стафилококками и Corynebacterium spp. [73].

Таблица 1

Локализация основных возбудителей мастита в структурах молочной железы

и особенности их распространения

Localization and distribution patterns of mastitis pathogens in bovine mammary tissue

При системном лечении представляет сложность поддержание терапевтических концентраций в молоке или тканях вымени. Лишь немногие препараты обладали оптимальными фармакокинетическими и фармакодинамическими характеристиками. Окситетрациклин, триметоприм-сульфонамид и цефтиофур демонстрировали при поддержании терапевтических концентраций низкую эффективность [74].

Макролиды (спирамицин и тилозин) теоретически показывали идеальную фармакокинетику, однако клинические исследования не подтвердили их эффективность [75].

Недостаточная дозировка антибиотиков для крупного рогатого скота могла привести к раздражению и остаточным количествам в продукции. Пенициллин G плохо проникал в молочную железу, в то время как пенетамат, обладая большей липофильностью, в молоко диффундировал лучше [75]. Комбинации с аминогликозидами не рекомендуются из-за отсутствия доказанной эффективности и риска выявления их остаточных количеств [76].

При мастите, вызванном S. aureus, системное лечение показало положительный эффект [77, 78]. При тяжелом мастите (E. coli) эффективность парентерального введения препаратов была сомнительна [79]. Рекомендовано использование системного лечения фторхинолонами, цефхиномом [80–82] и цефтиофуром [83].

Противомикробные препараты для системного лечения получили национальное одобрение. Их коммерческая доступность варьировалась в зависимости от страны и ветеринарных норм. Не подтвержден факт, что введение бактерицидных препаратов при тяжелом колиформном мастите вызывает выброс эндотоксинов [84].

Современные фармакологические методы и протоколы лечения клинического мастита

В ходе лечения клинического мастита у крупного рогатого скота применяется целенаправленный подход к генетической идентификации возбудителей инфекции с использованием метода ПЦР. Терапия в острых случаях базировалась на данных о микробиологии стада, что подтвердило значимость быстрой бактериологической диагностики для выбора эффективных противомикробных препаратов [85, 86]. Протоколы лечения разрабатываются с учетом специфических условий хозяйства и эпизоотической ситуации [69, 87].

Применение письменных и электронных протоколов соответствует стандартам качества (ГОСТ ИСО 9001-2015) и способствует правильному применению препаратов. Оценка терапевтического ответа осуществлялась через анализ соматических клеток, калифорнийский тест на мастит и бактериологические посевы [84, 88, 89]. Системный подход к диагностике и лечению мастита позволил повысить эффективность терапии и снизить риск резистентности к антибиотикам, что было подтверждено результатами клинических испытаний [85, 88].

При выборе препаратов предпочтение отдавалось средствам узкого спектра действия (табл. 2). В качестве первого выбора для лечения мастита, вызванного стрептококками и чувствительными к пенициллину стафилококками, использовались β-лактамные антибиотики, преимущественно пенициллин G. Применение широкоспектровых антибиотиков, включая цефалоспорины III и IV поколений, не рекомендовалось из-за риска резистентности [85].

При клиническом мастите, вызванном St. aureus, применялось системное лечение. В тяжелых случаях колиформного мастита использовалось комбинированное лечение с применением IMM [78]. Установлено, что низкая эффективность лечения могла быть связана с короткой продолжительностью стандартной терапии, поэтому рекомендовался курс лечения продолжительностью не менее трех дней, что превышало стандартные рекомендации, особенно в отношении S. aureus и S. uberis [86, 87–89]. Лечение должно основываться на доказательствах, включающих результаты посевов и данные о специфичности препаратов [23, 40, 41, 44, 64, 70, 76, 77, 90].

В результате исследований было подтверждено, что для лечения мастита предпочтительно использование узкоспектровых антибиотиков, таких как пенициллин G, при инфекциях, вызванных стрептококками и чувствительными стафилококками. Применение широкоспектровых антибиотиков, включая цефалоспорины III и IV поколений, способствовало развитию резистентности. При мастите, вызванном S. aureus, было рекомендовано системное лечение, а при тяжелых формах колиформного мастита – комбинированное с использованием IMM.

Таблица 2

Антимикробные препараты для лечения мастита

Availability of Antimicrobial Therapy for Mastitis