Введение. В скотоводческих хозяйствах маститы являются одной из распространенных болезней, где ежегодно переболевают различными формами маститов от 30 до 60 % коров. Причинами возникновения субклинических и клинических форм маститов, кроме не надлежащего содержания и кормления коров, является биологический фактор – патогенные и условно-патогенные микроорганизмы, такие как Streptococcus spp., Staphylococcus spp., E. coli, Mycoplasma bovis, грибы Aspergillus spp., Candida spp. – возбудители акушерско-гинекологических заболеваний [1–4].Маститы, особенно субклинические формы, причиняют производителям молока большой экономический ущерб, что связано с ухудшением качества молока и заболеваниями новорожденных телят вследствие приема некачественного молока/молозива, а также расходов на лечебно-оздоровительные мероприятия [5].Широкое применение лекарственных средств для лечения и профилактики маститов не всегда достигает своей цели. Это связано с тем, что многие возбудители болезни по ходу их применения приобретают устойчивость к ним. Отрицательно сказывается также остаточное содержание антибиотиков на качество молока [6]. Поэтому необходимо изыскать новые подходы для борьбы с маститами коров. Нами для специфической профилактики мастита коров разработана вакцина поливалентная на основе инактивированных антигенов бактерий Streptococcus uberis, Staphylococcus aureus, E. coli – возбудителей мастита коров.Цель исследования – доклиническое изучение поливалентной вакцины против мастита коров.Объекты и методы. При доклиническом исследовании проводили изучение физико-химических характеристик вакцины, полноты инактивации и стерильности, безвредности, пирогенности, антигенной активности, а также определение оптимальной прививной дозы вакцины для коров.Определение физико-химических характеристик вакцины проводили визуально. Контроль стерильности вакцины проводили микробиологическим путем по ГОСТ 28085-2013 «Средства лекарственные биологические для ветеринарного применения. Методы контроля стерильности», определение безвредности – по ГОСТ 31926-2013 «Средства лекарственные биологические для ветеринарного применения. Методы определения безвредности».Определение пирогенности вакцины проводили на трех кроликах живой массой от 2,5 до 3,5 кг. В период проведения опытов кролики находились в отдельной комнате с постоянной температурой, с колебанием не более чем на ± 2 °С. Измерение температуры тела у кроликов осуществляли после введения вакцины пять раз с промежутками в один час. Вакцину считали не пирогенной, если сумма повышений температуры у кроликов была меньше или равна 1,4 °С.Исследованием титров специфических антител в сыворотке крови вакцинированных животных оценивали антигенную активность вакцины. Для этого трем кроликам массой от 2,0 до 2,5 кг подкожно вводили испытуемую вакцину двукратно с интервалом 14 сут в дозе 2 см3. Титры специфических антител к антигенам бактерий Streptococcus uberis, Staphylococcus aureus, E. coli определяли в сыворотке крови на 14 сутки после второй вакцинации в реакции агглютинации.Определение оптимальной прививной дозы поливалентной вакцины проводили на 15 коровах в возрасте от 3 до 5 лет, живой массой от 550 до 650 кг, разделенных на три группы по пять голов в каждой. Коровам первой группы вакцину вводили двукратно, подкожно в дозе 3 см3, второй группы – 5 см3, третьей группы – 7 см3. От животных до введения вакцины, через 14 сут после первой и второй иммунизации отбирали пробы крови для определения титров специфических антител. По уровню антител определяли оптимальную прививную дозу вакцины. Результаты и их обсуждение. Поливалентная вакцина против мастита коров изготовлена на основе инактивированных антигенов штаммов бактерий – возбудителей мастита коров Streptococcus uberis «3Т-СД», Staphylococcus aureus «18-Ц», E. coli «19-СД». Физико-химические и иммунобиологические показатели вакцины представлены в таблице 1.Показатели антигенной активности вакцины представлены в таблице 2.  Таблица 1Физико-химические и иммунобиологические показатели поливалентной вакцины против мастита коровPhysico-chemical and immunobiological parameters of the multivalent vaccine against cow mastitis ПоказательПоливалентная вакцина против мастита коровФизико-химические свойстваСуспензия серовато-желтоватого цветаСтерильностьСтерильнаБезвредностьБезвреднаПирогенностьАпирогеннаАнтигенная активность в РАИндуцирует образование специфических антител:к Streptococcus uberis «3Т-СД» – 853,33±261,28;Staphylococcus aureus «18-Ц» – 640,0±0,0;E. coli «19-СД» – 640,0±0,0Таблица 2Титры специфических антител в сыворотке крови кроликов, иммунизированных вакциной против мастита коров (M ± m) (n = 3)Titers of specific antibodies in the blood serum of rabbits immunized with the cow mastitis vaccine (M ± m) (n = 3) Номер сериивакциныВид антигенав поливалентнойвакцинеУровень антител в РАСроки исследованиядо иммунизациипосле 1-йиммунизациипосле 2-йиммунизации1Staphylococcus aureus0,0 ± 0,0213,33 ± 65,32853,33 ± 61,28Streptococcus uberis0,0 ± 0,0160,0 ± 0,0640,0 ± 0,0E. coli0,0 ± 0,0213,33 ± 65,32640,0 ± 0,02Staphylococcus aureus0,0 ± 0,0213,33 ± 65,32853,33 ± 61,28Streptococcus uberis0,0 ± 0,0213,33 ± 65,32640,0 ± 0,0E. coli0,0 ± 0,0160,0 ± 0,0640,0 ± 0,0  Из таблицы 2 видно, что поливалентная вакцина против мастита коров обладает выраженной антигенной активностью. При двукратном введении она способствует накоплению специфических антител в крови кроликов к антигену Staphylococcus aureus в титре 853,33 ± 261,28, к антигенам Streptococcus uberis и E. coli в титрах 640,0 ± 0,0. Результаты исследования по определению оптимальной дозы поливалентной вакцины для коров приведены в таблице 3. Таблица 3Титры специфических антител в сыворотке крови коров, вакцинированных разными дозами вакцины (M ± m) (n = 5)Titers of specific antibodies in the blood serum of cows vaccinated with different doses of the vaccine (M ± m) (n = 5) Дозавакцины,см3Видантигена в вакцинеУровень антител в РАСроки исследованиядо иммунизациипосле 1-йиммунизациипосле 2-йиммунизации3 + 3Staphylococcus aureus0,0±0,0256,00±43,82512,00±87,64Streptococcus uberis0,0±0,0160,00±0,00320,00±0,00E. coli0,0±0,0192,00±35,78384,00±71,555 + 5Staphylococcus aureus0,0±0,0512,00±87,641024,00±175,27Streptococcus uberis0,0±0,0512,00±87,641024,00±175,27E. coli0,0±0,0576,00±71,551152,00±143,117 + 7Staphylococcus aureus0,0±0,0576,00±71,551152,00±143,11Streptococcus uberis0,0±0,0576,00±71,551152,00±143,11E. coli0,0±0,0576,00±71,551152,00±143,11  Данные, приведенные в таблице 3, свидетельствуют, что иммунизация коров поливалентной вакциной сопровождается образованием специфических антител в крови животных в высоких титрах против всех антигенных компонентов вакцины. Наиболее высокие титры выявлены у животных второй и третьей групп, двукратно вакцинированных в дозах 5 и 10 см3, соответственно. У животных третьей группы они были чуть выше, но достоверной разницы между титрами антител животных второй группы не выявлено. Таким образом, оптимальной прививной дозой вакцины для коров является 5 см3 при двукратном ее применении.При исследовании установлено также, что после двукратного введения вакцины в профилактической и повышенной дозах у животных сохраняется нормальное физиологическое состояние. У них отсутствуют признаки патологических местных и системных реакций. Животные активно передвигаются, охотно принимают корм и воду, общая температура тела у них остается в пределах физиологической нормы (табл. 4, 5). Таблица 4Показатели температуры тела коров после 1-й вакцинации (M± m) (n = 5)Body temperature of cows after 1 vaccination (M± m) (n = 5) Группаживотных(доза вакцины)Инвентарный номерживотногоТемпература тела животных, °СПеред введением вакциныПосле введения вакцинычерез 24 ччерез 48 ччерез 96 чПервая –опытная(5 см3)28038,638,438,538,590038,138,438,238,192238,438,538,538,666438,538,538,438,5132438,738,638,538,6Средняя38,46±0,1238,48±0,0438,42±0,0738,46±0,10Вторая –опытная(10 см3)84638,538,338,438,594838,538,538,538,5141438,838,538,638,5118238,938,838,738,516/2238,838,538,538,6Средняя38,70±0,0938,52±0,0938,54± 0,0638,52±0,02Третья –контрольная73238,738,638,538,6175638,438,438,438,4149438,538,538,638,512/2538,738,738,638,5159038,638,738,638,6Средняя38,58±0,0738,58±0,0738,54±0,0438,52±0,04 Таблица 5Показатели температуры тела коров после 2-й вакцинации (M± m) (n = 5)Body temperature of cows after the 2nd vaccination (M± m) (n = 5) Группа животных(доза вакцины)Инвентарныйномер животногоТемпература тела животных, °СПеред ведениемвакциныПосле введения вакцинычерез 24 ччерез 48 ччерез 96 ч123456Первая –опытная(5см3)28038,538,538,438,590038,338,538,438,292238,538,438,538,566438,538,538,538,5132438,638,538,638,5Средняя38,48±0,0538,48±0,0238,48±0,0438,44±0,07Вторая –опытная(10 см3)84638,438,438,538,494838,538,538,538,6141438,638,538,638,5118238,838,838,838,516/2238,738,538,638,6Средняя38,60±0,0838,54±0,0838,60±0,0638,52±0,04Окончание табл. 5123456Третья – контрольная73238,638,438,338,5175638,538,338,538,4149438,438,538,438,512/2538,538,538,438,5159038,338,438,338,3Средняя38,46±0,0638,42±0,0438,38±0,0438,44±0,04  На месте введения вакцины в первые часы отмечается небольшая припухлость, самопроизвольно исчезающая в течение суток. Отличия в физиологическом состоянии у животных опытных и контрольной групп не отмечены. Заключение Для специфической профилактики мастита коров изготовлена поливалентная вакцина на основе антигенов бактерий Streptococcus uberis, Staphylococcus aureus и E. coli.Доклиническое исследование вакцины показало, что она стерильна, безвредна для животных, не пирогенна, обладает выраженной антигенной активностью.Оптимальной прививной дозой для коров является 5 см3 при двукратном ее применении с интервалом 14 сут.