Введение. На протяжении последних десятилетий во многих странах мира регистрируют достаточно высокий уровень рисков, связанных с распространением резистентности возбудителей инфекционных болезней к антибактериальным препаратам [1–5]. Данная тенденция требует системных и безотлагательных исследований по решению проблемы на мировом уровне, что подтверждается принятием Генеральной Ассамб­леей ООН Глобального плана действий по борьбе с устойчивостью к противомикробным препаратам. В это же время в Российской Федерации также была утверждена «Стратегия предупреждения и преодоления устойчивости микроорганизмов и вредных организмов растений к лекарственным препаратам, химическим и биологическим средствам на период до 2030 г.». Проведенный анализ показал, что отечественные мероприятия Стратегии отличаются от других национальных программ формированием комплексного подхода к организации межведомственного и междисциплинарного взаимодействий.К основным задачам отечественной Стратегии относятся:совершенствование мер по предупреждению и ограничению распространения и циркуляции возбудителей с антимикробной резистентностью;обеспечение системного мониторинга распространения антимикробной резистентности;изучение механизмов возникновения антимикробной резистентности и разработка противомикробных препаратов и альтернативных методов для профилактики и лечения инфек­ционных болезней человека и животных.Применение препаратов вирулентных (литических) бактериофагов для профилактики и лечения заболеваний, вызванных патогенными и условно-патогенными микроорганизмами, яв­ляется одним из возможных подходов к решению проблемы антибиотикорезистентности [6–10].В настоящее время доказано, что бактериофаги обладают рядом биологических особен­ностей, которые дают возможность использовать их в качестве эффективных биологических организмов для терапии заболеваний бакте­риальной этиологии [10–12].По мнению ряда ученых, основным механизмом антимикробного действия бактериофагов является лизис бактериальных клеток в результате трансформации метаболизма зараженных клеток на синтез фаговых частиц, которые впоследствии разрушаются за счет активации бактериальных аутолизинов [13].Неорганические вещества в виде наночас­тиц, в частности серебра, по данным ряда исследователей, также являются одним из перспективных направлений при разработке антимикробных агентов [14–16].Современная ветеринарно-санитарная ситуация в птицеводстве, связанная со снижением эффективности применения антимикробных препаратов, выдвигает на первый план поиск новых средств и методов борьбы с инфекциями бактериальной этиологии [16–18].Анализ литературы показал, что бактериофаги и производные нанокластерного серебра можно применять для профилактики и лечения ряда бактериальных инфекций птиц, в частности сальмонеллеза [19].Цель исследования – научное обоснование и экспериментальное подтверждение комплексного подхода к применению антимикробных препаратов на основе бактериофагов и препарата серебра.Материалы и методы. Работа выполнена на кафедре ветеринарной микробиологии инфек­ционных и инвазионных болезней Омской облас­тной лаборатории и в птицеводческом хозяйстве Омской области. Комплексные микробиологичес­кие исследования проводили согласно общепринятым методам. На основании морфологических и культурально-биохимических характеристик, используя определитель бактерий Берджи (1997) и справочник зоопатогенных микроорганизмов (Сидоров М.А. и др. (1995)), проводили таксономическую идентификацию изолированных культур микроорганизмов. Также использовали «Методические указания 4.2.2.723-10. Лабораторная диагностика сальмонеллезов, обнаружение саль­монелл в пищевых продуктах и объектах окружающей среды» и руководство «Лабораторная диагностика сальмонеллезов человека и животных, обнаружение сальмонелл в кормах, продуктах питания и объектах внешней среды» (1990). Видовую идентификацию выделенных культур проводили с помощью метода времяпролетной масс-спектрометрии с матрично-ассоциирован­ной лазерной десорбцией/ионизацией (MALDI-TOF MS) с использованием масс-спектрометра VITEK NS и программного обеспечения Biotyper RTS (Германия). При этом учитывали, что значение Score ³ 2,0 является критерием надежной видовой идентификации микроорганизмов. Для определения чувствительности выделенных микроорганизмов (Salmonella spp.) к антимикробным препаратам применяли диско-диффузион­ный метод в соответствии с рекомендациями «Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам» (версия 2021-01). Кроме того, клинические категории устойчивости тестируемых изолятов определены в соответствии с рекомендациями EUCAST раздела «Breakpoint tables for interpretation of MICS and zore diameters» (версия 10,0 от 01.01.2020).Для экспериментальных исследований использовали противосальмонеллезный штамм Phagum Salmonella enteritidis DS-1, полученный нами из сточных вод и фекалий птиц и депонированный в коллекции ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора под номером Ph-1343.Препарат «Арговит» синтезирован на основе высокодисперсного (кластерного) серебра, стабилизированного низкомолекулярным поливинил-пирролидоном (ООО НПЦ «Вектор-Вита»).Антагонистическую активность препарата «Арговит» изучали в отношении к выделенным патогенным и условно-патогенным микроорганизмам. Для этого изолированные культуры культивировали на скошенном мясо-пептонном агаре. Затем готовили ряд серийных разведений в стерильной воде до 106 мк/мл. Диски (d = 8 мм), пропитанные раствором препарата «Арговит», размещали на поверхность питательной среды в чашках Петри. Концентрация препарата находилась в пределах от 10 до 100 мкг/мл. В качестве контроля использовали диски, пропитанные стерильной водой.Для статистической обработки полученных в ходе исследований экспериментальных данных использовали Т-критерий Манна–Уитни с применением прикладного программного пакета MS Exel. Допустимый уровень статистической значимости составил 5 %.Результаты и их обсуждение. В результате проведенного ретроспективного статистического анализа и собственных исследований установлено, что наиболее часто из проб патологического материала, фекалий, элементов технологического оборудования были изолированы микроорганизмы следующих родов и видов: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Salmonella spp., Proteus vulgaris, Pseudomonas aerugi­nosa. Также необходимо отметить, что данные микроорганизмы были выделены не только в монокультуре, но и в различных ассоциациях, в частности E. coli + Proteus vulgaris (21,4 %); E. coli + Salmonella spp. (15,9 %); E. coli + Staphylococcus aureus (26,4 %); Salmonella spp.+ Sta­phylococcus aureus (18,6 %).Проведенные исследования показали, что культуры Salmonella spp., выделенные из патологического материала, в большинстве случаев проявляли множественную антибактериальную устойчивость к 80 % препаратов от числа активно применяемых в условиях птицеводческих хозяйств региона (табл. 1).  Таблица 1 Определение чувствительности выделенных культур Salmonella к антибактериальным препаратам КультурамикроорганизмовАнтибактериальные препаратыТКФДоксилокс ОРКаридоксДолинкАвиамутинТрифлонКарифлоксЭнроксилКолмик ЕЭнрофлонКоноэкс-10Salmonella enteritidisRRRRRRЧRЧRSalmonella gallinarumRRЧRЧRЧЧЧRSalmonella typhimoriumRRRRRRЧRЧRПримечание: R – резистентные; Ч – чувствительные; Т – тетрациклины; К – комплексные антибактериальные препараты; Ф – фторхинолоны.  Так, все три вида Salmonella были резистентными к тестируемым антимикробным препаратам тетрациклинового ряда (доксилокс-ОР, каридокс), в несколько меньшей степени к комплексным препаратам из группы фторхинолонов.В рамках изучения морфологии фага DS-1 методом агаровых слоев установлено, что образуемые негативные колонии диаметром от 1,0 до 3,0 мм имели округлую форму, ровные контурированые края; центральная часть колоний фагов, как правило, прозрачная. На газоне тестируемых культур обнаруживали вокруг зон лизиса просветленные участки размером около 0,5 мм.При изучении литической активности выделенного сальмонеллезного бактериофага (DS-1) установлено, что она составляет по методу Апельмана 1010, по методу Грациа 2,0·1010. Кроме того, анализ данных, полученных при изучении специфичности бактериофага, показал, что он обладал литическим действием в отношении культур S. enteritidis.Тестовые исследования препарата «Арговит» показали, что он обладает выраженным антимикробным действием.Установлено, что препарат «Арговит» уже при концентрации 10 мкг/мл обладал ингибирующим действием в отношении выделенных бактерий (табл. 2). Таблица 2 Ингибирование роста микроорганизмов препаратом «Арговит» Радиус зоны ингибирования (R)* ммКонцентрация препарата «Арговит», мкг/млКультура микроорганизмовSalmonella enteritidisPseudomonas aeroginosaProteus vulgarisEscherichia coliStaphylococcusaureus1012,0±2,09,0±0,610,0±0,511,0±0,612,0±2,32014,0±1,313,3±1,214,0±0,712,3±0,813,3±2,23015,0±0,614,0±0,813,6±0,913,9±1,214,3±2,14017,0±1,816,6±1,115,3±2,015,0±1,614,0±2,05019,0±0,817,7±1,615,9±1,616,8±2,015,3±1,96020,0±2,319,1±1,617,0±2,116,3±1,915,8±1,67021,0±1,819,6±1,817,8±1,716,9±1,616,0±1,98023,0±2,122,7±2,220,3±2,017,7±1,217,1±1,69024,0±2,626,0±1,923,0±2,221,0±1,623,0±2,010024,0±2,2    Примечание: * – среднее значение 5 наблюдений, P £ 0,05.  На втором этапе исследований было сформировано три опытных группы цыплят-брой­леров по 10 гол. в каждой. Моделирование сальмонеллезной инфекции у цыплят-брой­леров проводили посредством заражения10-суточных цыплят перорально, суспензией сальмонелл из расчета 1 · 109 КОЕ/мл на 1 голову. Культура Salmonella была предварительно выделена из патологического материала павших цыплят на предприятии. Птице первой опытной группы выпаивали суспензию сальмонеллезного бактериофага DS-1 в дозе 0,5 мл. Цыплятам второй опытной группы сальмонеллезный бактериофаг DS-1 применяли совместно с препаратом «Арговит» в дозе 0,5 и 1,5 млсоответственно. Третьей группе вводили антибиотик энрофлоксацин, рекомендованный при сальмонеллезах птицы согласно инструкции фирмы-производителя.Анализ результатов экспериментальных исследований показал, что у цыплят в первой и второй группах установлено достоверное увеличение лактобактерий до 6,27 ± 0,17 и 7,35 ± 0,10 lg КОЕ/г соответственно.Кроме того, зарегистрировано достоверное увеличение количества бифидобактерий как в первой, так и во второй опытных группах до 6,53 ± 0,09 и 7,01 ± 0,06 lg КОЕ/г соответственно. Указанную тенденцию наблюдали и в отношении лактозопозитивных энтеробактерий. Вместе с тем и в первой, и во второй опытных группах установлено достоверное снижение количества лактозоотрицательных энтеробактерий. Необходимо отметить, что после первого комплексного применения сальмонеллезного бактериофага и препарата «Арговит» экспериментально зараженным цыплятам-бройлерам только в трех из 10 проб фекалий были выделены культуры S. enteritidis.После второго сочетанного введения указанных препаратов (на 22-е сут) сальмонеллезные культуры не выделяли.Кроме того, установлено, что сочетанное применение сальмонеллезного бактериофага и препарата «Арговит» у цыплят-бройлеров при экспериментальной сальмонеллезной инфекции увеличивает на 60 % терапевтическую эффективность по сравнению с традиционной схемой с использованием антибиотиков.Таким образом, проведенные исследования позволяют констатировать, что сальмонеллезный бактериофаг и препарат «Арговит», созданный на основе кластерного серебра, обладают хорошо выраженными противомикробными характеристиками в отношении бактерий рода Salmonella spp. in vitro. Кроме того, комплексное использование препаратов при лечении экспериментального сальмонеллеза у цыплят-бройлеров способствовало оптимизации энтеромикробиома, снижая уровень условно-патогенных и патогенных бактерий, в частности Salmonella spp.