Введение. Распространение различных бо- лезней животных в Казахстане является одной из наиболее актуальных проблем животновод- ства республики. Болезни представляют угрозу не только для продуктивности животных, но и для жизни животных в целом [1].Инфекционный узелковый дерматит – это трансмиссивное заболевание крупного рогатого скота и азиатских буйволов, которое характе- ризуется поражением кожи в виде узелков. Эта болезнь эндемична по всей Африке и Ближнему Востоку, а с 2015 г. она распространилась на Балканы, Кавказ, юг Российской Федерации, где болезнь продолжает распространяться, несмо- тря на принятые меры по ее профилактике [2, 3]. Новые вспышки нодулярного дерматита в России были зафиксированы 25 мая 2016 г. в Краснодарском крае. С 29 мая по 12 июня в Ре- спублике Дагестан было найдено 15 очагов забо- левания, где они были обнаружены на фермах, в которых содержалось в общей сложности 360645 животных [4].Первые случаи нодулярното дерматита КРС в Казахстане были зафиксированы в 2016 г. на западе страны. 7 тысяч животных заболели, из них 1 150 умерли. Вирусный нодулярный дерма- тит был выявлен в Костанайской, Акмолинской, Северо-Казахстанской и Павлодарской областях. В 2017 г., благодаря усилиям ветеринарных служб, новых вспышек в регионах удалось избе-жать. Однако новые очаги болезни появились в других регионах страны.С 2016 по 2018 г. нодулярным дерматитом было поражено большое поголовье КРС и выяв- лено много очагов заболевания, которые начали распространяться из мест первичных вспышек на границах республики вглубь страны [5].Нодулярный дерматит – это экзотическое трансграничное заболевание, согласно клас- сификации Международного эпизоотического бюро, оно относится к первой группе особо опас- ных заболеваний, наряду с сибирской язвой и бе- шенством, и характеризуется как экономически и социально значимое заболевание. Передача ви- русной инфекции осуществляется кровососущи- ми насекомыми, но она также может распростра- няться и через потребление зараженных кормов или воды, прямым контактом с животными, спа- риванием или искусственным осеменением [6].Антигенные свойства, родство и изменчи- вость вируса нодулярного дерматита изучены не полностью. Антигенно вирус связан с вирусом оспы овец и, возможно, вирусом оспы козы.При культивировании вируса нодулярного дерматита используются первичные культуры клеток органов ягнят, детей и телят.Для диагностики вируса нодулярного дерма- тита в настоящее время используются вироско- пия, твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА), реакция иммунофлуоресценции, реакция иммунодиффузии в агаровом геле, полимераз-ная цепная реакция (ПЦР), реакция нейтрали- зации и непрямые флуоресцентные антитела; выделение вируса путем заражения культуры клеток и его обнаружение с помощью электрон- ной микроскопии; а также постановка биоанализа на естественно восприимчивых животных.Нодулярный дерматит является относитель- но новой болезнью, требующей разработки ме- тодов диагностики, поэтому изучение возмож- ности диагностировать заболевание с помощью серологических методов диагностики оспы овец является актуальным на сегодняшний день [7, 8]. Из-за сложной эпизоотической ситуации и угрозы дальнейшего распространения нодуляр- ного дерматита на территории Республики Ка- захстан актуальной задачей является изучение биологических свойств возбудителя с целью раз- работки высокоэффективных диагностических препаратов и специфических профилактических средств, а также использование серологической диагностики оспы овец с помощью РСК, РДСК, РДП, так как они антигенно связаны с нодуляр- ным дерматитом КРС, что позволило бы в корот- кие сроки выявить возбудителя и быстро остано-вить распространение инфекции.Цель исследования: разработка методов специфической диагностики нодулярного дерма- тита с применением диагностикума оспы овец.Задачи исследования: провести исследо- вания, определяющие возможность диагностики нодулярного дерматита КРС при использовании средств и методов диагностики оспы овец.Объекты и методы исследования. Объекты исследования – кожа КРС с клиническими при- знаками нодулярного дерматита; кожа здорового КРС; сыворотка крови больного и переболев- шего нодулярным дерматитом КРС; сыворотка крови здоровых животных; наборы диагности- кумов для РСК и РДП при оспе овец производ- ства НИИ проблем биологической безопасности (пгт. Гвардейский Жамбылской области Респуб- лики Казахстан).Исследуемый материал от КРС с клиничес- кими признаками нодулярного дерматита (кожа и сыворотка крови переболевших животных) был получен в районной ветеринарной станции г. Аксу Павлодарской области. Для контроля специфичности метода использовали материал, полученный в районной ветеринарной стан- ции г. Аксу Павлодарской области от здоровых животных и животных с проявлением сходных клинических признаков поражения кожи, но без положительной реакции по вирусоскопии. Здесь же для прижизненной диагностики у больныхживотных были взяты образцы сыворотки кро- ви на разных стадиях инфекционного процесса (начальный период, выраженные признаки забо- левания, выздоровление).Всего исследовано 32 пробы сыворотки крови больных и здоровых животных с антигеном ви- руса оспы овец и 12 проб органотканевого мате- риала. Все реакции для статистической обработ- ки проводили в пяти вариантах.В процессе исследования применяли методы вирусоскопии (окраска по методу А.М. Морозова, 1925); РСК в модификации длительного связы- вания комплемента; РДП по методу Оухтерлони, используя 1 % агар Difco, поддерживая реакцию при температуре (37±1) °C в течение двадцати четырех часов.Для получения образцов сыворотки крови отбор производился в стерильные пробирки, которые помещали в термостат при темпера- туре (37±1) °С на три-четыре часа. После от- деления сыворотки ее разливали в отдельные стерильные пробирки, при необходимости цен- трифугировали для осаждения клеток крови и использовали в серологических реакциях для обнаружения антител.Для исследования в серологических реакциях на обнаружение вирусного антигена нодулярного дерматита КРС использовали участки поражен- ной кожи, из проб которых была приготовлена 20 % суспензия в физиологическом растворе, которую однократно замораживали и оттаива- ли, центрифугировали при 4000–5000 об/мин в течение 30 мин и супернатант использовали для исследования.Результат РСК считали положительным, если в двух пробирках с последовательными разведе- ниями испытуемого материала (сыворотки или органотканевого антигена) была полная (задерж- ка гемолиза 100 %) или выраженная задержка ге- молиза, по меньшей мере, на 2 креста в каждой пробирке (гемолиз 50 %) или более выраженная (25–0 % гемолиз). За титр испытуемого мате- риала в этом случае принимали последнее его разведение, вызывающее задержку гемолиза на 50 % и более.Результат РДП в агаровом геле по методу Оухтерлони считался положительным, если между лунками с исследуемым материалом (ор- ганотканевой материал или сыворотка крови) и диагностическим препаратом образовались визуально заметные полосы преципитации. По- следнее разведение испытуемого материала, вызывающее проявление линии преципитации, принимали за его титр [9].При исследовании сыворотки крови диагности- ческие антигены вируса оспы овец вводили в цен- тральные лунки в разведении 1 : 2, в перифериче- ских исследуемая сыворотка крови была интактной. При постановке реакции для проверки специ- фичности и активности диагностических препа- ратов делали постановку контрольных проб отздоровых животных.Серологические реакции РДСК, РДП были использованы для определения специфической активности сыворотки крови животных, а также для выявления и количественного определения специфических антигенов вируса нодулярного дерматита КРС в коже больных животных.В количественной версии РДСК и РДП иссле- дуемый материал использовали в виде суспен- зии пораженных участков кожи в разведениях от 1 : 2 до 1 : 24, либо сыворотки в разведениях от цельного до 1 : 32, реакции проводили с соот- ветствующими специфическими и контрольными нормальными диагностическими препаратами,взятыми в рабочем разведении, и комплементом с использованием его четырехкратного предель- ного титра в гемолитической системе.В качественном варианте РДСК и РДП иссле- дуемый материал использовали в разведении 1 : 2. Статистическую обработку полученных дан- ных проводили разностным методом Стьюдента,описанным В.А. Чистяковым [10].Результаты исследования и их обсужде- ние. Как видно из данных, представленных в таблице 1, вирус-специфические антитела, свя- занные с антигеном вируса Sheeppox, были об- наружены в сыворотке крови больных животных в разные периоды заболевания. Так, у животных с выраженными клиническими признаками – в титрах до 1 : 8 в РДСК и в разведениях до 1 : 2 в РДП. У переболевших животных он составил в РДСК до 1 : 16 и РДП до 1 : 4.Сыворотка крови от животных с другими забо- леваниями и сыворотка крови от здорового скота показали отрицательную реакцию. Таблица 1Результаты серологических реакций при исследовании проб сыворотки крови больного КРС с антигеном вируса оспы овец  Испытуемые сыворотки крови от животныхКол-во пробАнтиген вируса оспы овецРДСКРДПС выраженными клиническими признаками121 : 2–1 : 8Ц–1 : 2Выздоровевших (реконвалесцентов)41 : 4–1 : 161 : 2–1 : 4Больных дерматитомбез положительной вирусоскопии10––Здоровых6–– Из данных таблицы 2 видно, что при использо- вании специфической сыворотки для вируса оспы овец антигены нодулярного дерматита КРС были обнаружены в образцах кожи в титрах от целого до 1 : 8 в РДСК и в разведениях до 1 : 4 в РДП.Исследования по контролю специфичности препаратов кожи КРС, полученных от здоровых и больных животных с другими кожными заболева- ниями, показали отрицательный результат. Таблица 2Результаты исследования в РДСК и РДП проб органотканевого материала у КРС Органотканевой материалКол-во пробСыворотка к оспе овецРДСКРДППодтвержденный вирусоскопией на наличие оспоподобного вируса41 : 4–1 : 81 : 2–1 : 4С отрицательной вирусоскопией4––Контроль (материал от здоровых животных)4––В результате проведенных исследований было установлено, что серологические реакции на нодулярный дерматит у КРС могут быть вы- полнены с использованием средств и методов диагностики оспы овец. Прямая диагностикаНа основании проведенного исследования ниже предлагается схема прямой и ретроспек- тивной серологической диагностики нодулярного дерматита КРС (рис.). Ретроспективная диагностика  Нодулярный дерматитне подтвержден Отрицательный результатРДСК, РДПс использованиемвируса оспы овец Вирусоскопия по Морозову     Положительный результат РДСК, РДППоложительный результат (диагноз на НД КРСподтвержден) Отрицательный результат (диагноз на НД КРСне подтвержден) с использованием диагностического антигена вируса оспы овец Положительный результатОтрицательный результат  Диагноз подтвержденДиагнозне подтвержден   Противоэпизоотические мероприятия Схема прямой и ретроспективной серологической диагностики нодулярного дерматита КРС Для прямой диагностики (обнаружения вирус- ного антигена) в качестве проб патологического материала необходимо использовать кусочки по- раженной кожи КРС.На первом этапе готовят мазок-отпечаток из пораженной кожи на участке, граничащем со здо- ровой кожей. Мазок окрашивают по методу сере- брения по А.М. Морозову.При отрицательном результате вирусоскопии по А.М. Морозову проводят дальнейшую диагно- стику на наличие других заразных или незараз- ных заболеваний, вызывающих дерматиты.При положительном результате вирусоскопии из участков пораженной кожи готовят суспензию на физиологическом растворе, которую иссле- дуют методами РДСК и РДП с использованием специфических диагностических сывороток при оспе овец. При положительном результате диа- гноз на нодулярный дерматит КРС считают уста- новленным.Для ретроспективной диагностики нодуляр- ного дерматита КРС отбирают сыворотки крови от больных и переболевших животных, которые исследуют методами РДСК и РДП с использо- ванием диагностических антигенов, взятых из наборов для диагностики при оспе овец. Положи- тельный результат серологических реакций сви- детельствует о болезни или переболевании КРС нодулярным дерматитом.Этот метод в настоящее время рекомендует- ся для индикативной и дифференциальной диа- гностики нодулярного дерматита КРС. С этой це- лью предлагается к практическому применению для КРС использование разработанной схемы прямой и ретроспективной серологической диа- гностики заболевания.Выводы. Нодулярный дерматит является от- носительно новым и не типичным для Казахста- на инфекционным заболеванием КРС.В реакциях диффузионного осаждения и свя- зывания комплемента с использованием диа- гностических наборов для оспы овец была под- тверждена антигенная связь между нодулярным вирусом КРС и вирусом оспы овец.Средства и методы лабораторной диагно- стики оспы овец могут быть использованы для прижизненной и посмертной диагностики ноду- лярного дерматита КРС с высокой степенью эф- фективности и надежности.